流動相溶液往往因溶解有氧氣或混入了空氣影響液相色譜的操作性能,在泵中產(chǎn)生氣泡使流速不穩(wěn),氣泡大時會在泵頭形成空穴.氣泡進入檢測器后會在色譜圖上出現(xiàn)尖銳的噪音峰,降低響應甚至導致信號消失.流動相中的氧對光電檢測器影響最大,使紫外檢測器基線增高,低波長檢測時信號被抵消.在熒光檢測中,溶解氧還會使熒光淬滅.溶解氣體還可能引起某些樣品的氧化或使溶液pH值發(fā)生變化.二、流動相脫氣的方法液相色譜流動相脫氣使用較多的方法大概有四種：氦氣脫氣、真空脫氣、超聲波脫氣、加熱脫氣.
1.氦氣脫氣：氦氣脫氣是很有效的脫氣方法.氦氣緩緩的通過流動相趕去溶入的空氣,如果使用得當,在10min內(nèi)可除去80%～90%的溶入氣體.由于氦氣在流動相中的溶解度極低,所以用氦氣脫氣保護的流動相可以認為是一個無氣體溶解體系.我們單位waters液相色譜就是使用氦氣脫氣,效果很好.其缺點是氦氣價格比較昂貴,會增加檢驗成本.
2.真空脫氣：也是比較常用的脫氣方法.貯液器被抽成部分真空,溶入的氣體蒸發(fā)形成氣泡溢出,其效果僅次于氦氣脫氣.我們單位Agileng1200液相色譜使用的是在線脫氣機.其缺點是需要配備抽氣泵或脫氣機,增加儀器投資.
3.超聲波脫氣：將配制好的流動相連容器放入超聲水槽中脫氣10-20min.這種方法比較簡便,又基本上能滿足日常分析操作的要求,所以,目前仍廣泛采用.這種方法只能除去30%的溶解氣體,有時還會引起氣體溶解度的增加.對氧敏感的檢測器不宜用此法.
4.加熱回流脫氣：該方法雖然效果很好,但是適用范圍較窄.對于有機溶劑或混合流動相不適合用此法,因為揮發(fā)性組分會損失掉,改變流動相的組成.
三、注意事項現(xiàn)在液相色譜大多都是多元系統(tǒng),可以同時輸送幾種不同的流動相.但需要注意的是,有些流動相不同組分混合時會有氣體產(chǎn)生,對于這種流動相應改系統(tǒng)內(nèi)混合為系統(tǒng)外預混合.測定三聚氰胺使用乙腈和辛烷磺酸鈉作為流動相,我們一個檢驗員當時就是分別脫氣后將流動相放在兩個瓶子里,結(jié)果基線波動很大,一直不能平穩(wěn)；后來采用預先混合脫氣的方式問題就解決了.