western blot和elisa用的二抗相同 為什么顯色液不同
western blot和elisa用的二抗相同 為什么顯色液不同
我們實(shí)驗(yàn)室的westernblot和ELISA試驗(yàn)中使用的二抗都是汗HRP標(biāo)記的二抗,同樣的二抗,但是在顯色的時(shí)候,westernblot使用的是DAB,ELISA使用的是TMB,請問為什么同樣都是辣根過氧化物酶標(biāo)記,但是顯色底物要使用不一樣的呢?是否僅僅是因?yàn)楣滔噍d體不同呢?
我們實(shí)驗(yàn)室的westernblot和ELISA試驗(yàn)中使用的二抗都是汗HRP標(biāo)記的二抗,同樣的二抗,但是在顯色的時(shí)候,westernblot使用的是DAB,ELISA使用的是TMB,請問為什么同樣都是辣根過氧化物酶標(biāo)記,但是顯色底物要使用不一樣的呢?是否僅僅是因?yàn)楣滔噍d體不同呢?
生物人氣：268 ℃時(shí)間：2020-04-22 07:39:53
優(yōu)質(zhì)解答
其實(shí)都是HRP催化底物反應(yīng),與固相載體無關(guān),他們在反應(yīng)的整個(gè)過程都起到了相同的作用－－供氫體 HRP的催化反應(yīng)需要底物過氧化氫(H2O2)和供氫體(DH2).供氫體多為無色的還原型染料,通過反應(yīng)可生成有色的氧化型染...
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