微生物、動(dòng)物、植物細(xì)胞培養(yǎng)的異同點(diǎn)如下:
◆不同點(diǎn):首先在培養(yǎng)基上,微生物是固體、半固體培養(yǎng)基都有,成分主要是水、無機(jī)鹽、生長因子、碳源、氮源等.如果是病毒的話要用細(xì)菌進(jìn)行培養(yǎng);動(dòng)物的話用天然培養(yǎng)基加生長因子比較好,一般是液體培養(yǎng)基,成分主要是水、葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素、動(dòng)物血清;而植物培養(yǎng)基用合成培養(yǎng)基就可以了,一般是固體培養(yǎng)基,成分主要是礦質(zhì)元素、蔗糖、纖維素、植物激素、有機(jī)添加劑.其次是各自培養(yǎng)的原理上的不同,微生物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是微生物細(xì)胞的增殖,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是細(xì)胞的增殖,植物細(xì)胞培養(yǎng)原理是細(xì)胞的全能性.
最后,微生物細(xì)胞培養(yǎng)主要是獲得其代謝產(chǎn)物或次級(jí)代謝產(chǎn)物或得到細(xì)胞本身;植物細(xì)胞培養(yǎng)是獲得新個(gè)體或細(xì)胞產(chǎn)品,應(yīng)用與快速繁殖試管苗、細(xì)胞產(chǎn)品、人工種子、轉(zhuǎn)基因植物的培育等.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是獲得大量新生細(xì)胞或細(xì)胞產(chǎn)品,應(yīng)用是獲得細(xì)胞的產(chǎn)物或細(xì)胞等.另外,動(dòng)物細(xì)胞分散用到的是胰蛋白酶,植物是纖維素酶等.
◆ 相同點(diǎn):兩者都需要培養(yǎng)基、都需要無菌操作,防止染菌、培養(yǎng)時(shí)候都需要適當(dāng)?shù)臏囟鹊葪l件.
◆ 綜上所述見下表:
微生物 動(dòng)物細(xì)胞 植物細(xì)胞
大?。╱m) 1~10 10~100 10~100
懸浮生長 可以 多數(shù)細(xì)胞需附著表面才能生長 可以,但易結(jié)團(tuán),無單個(gè)細(xì)胞
營養(yǎng)要求 簡(jiǎn)單 非常復(fù)雜 較復(fù)雜
生長速率 快,倍增時(shí)間為0.5~5小時(shí) 慢,倍增時(shí)間為15~100小時(shí) 慢,倍增時(shí)間為24~74小時(shí)
代謝調(diào)節(jié) 內(nèi)部 內(nèi)部,激素 內(nèi)部,激素
環(huán)境敏感 不敏感 非常敏感 能忍受廣泛范圍
細(xì)胞分化 無 有 高
剪切力敏感 低 非常高 高
傳統(tǒng)變異,篩選技術(shù) 廣泛使用 不常使用 有時(shí)使用
細(xì)胞或產(chǎn)物濃度 較高 低 低
由于它們所用的培養(yǎng)基不同,培養(yǎng)是所要求的條件不同所以在批量生產(chǎn)我們所需的目的產(chǎn)物時(shí)就要選擇相應(yīng)的生物反應(yīng)器.在選擇生物反應(yīng)器時(shí)要注意到生物反應(yīng)器在生物反應(yīng)過程的剪切力、傳質(zhì)問題如氣-液質(zhì)量傳遞和液-固質(zhì)量傳遞.生物反應(yīng)器是利用生物催化劑為細(xì)胞培養(yǎng)(或發(fā)酵)或酶反應(yīng)提供良好的反應(yīng)環(huán)境的設(shè)備,通常稱為發(fā)酵罐或酶反應(yīng)器.用于污水生物處理的曝氣池或厭氣消化罐也可作為生物反應(yīng)器的一類.生物反應(yīng)器是生物反應(yīng)過程中的關(guān)鍵設(shè)備,它的結(jié)構(gòu)、操作方式和操作條件對(duì)生物技術(shù)產(chǎn)品的質(zhì)量、轉(zhuǎn)化率和能耗有著密切關(guān)系.現(xiàn)在就三種生物反應(yīng)器進(jìn)行說明.
(一)微生物細(xì)胞培養(yǎng)生物反應(yīng)器的選擇
生物處理的主體是具有特定功能的各種微生物,由于氧化分解惡臭,微生物細(xì)胞一方面獲得了生物所需的能量,另一方面獲得細(xì)胞增殖所需的細(xì)胞物質(zhì),從而維持了細(xì)胞的正常生命活動(dòng).微生物有其自身的新陳代謝,代謝活動(dòng)都是在酶的作用下進(jìn)行的,只有創(chuàng)造適宜的生存條件,使酶的機(jī)能得以充分發(fā)揮,微生物才能正常生長,才能利用惡臭物質(zhì)作為生長所需的能源、碳源和氮源等,因此微生物細(xì)胞培養(yǎng)生物反應(yīng)器的選擇首先要確保微生物生長的基本條件.根據(jù)微生物的培養(yǎng)特點(diǎn),一般選擇生物反應(yīng)器為膜生物反應(yīng)器和光合微生物生物反應(yīng)器等.
(二)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)生物反應(yīng)器的選擇
動(dòng)物細(xì)胞與微生物細(xì)胞有很大的差異,對(duì)體外培養(yǎng)有嚴(yán)格的要求,如動(dòng)物細(xì)胞對(duì)剪切非常敏感,反應(yīng)器的選擇不能有像微生物細(xì)胞那樣高的剪切力,因此,傳統(tǒng)的微生物細(xì)胞生物反應(yīng)器應(yīng)該經(jīng)過改造才能適用動(dòng)物生物反應(yīng)器.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)分為三種類型,一類是懸浮培養(yǎng),指細(xì)胞在培養(yǎng)器中自有懸浮生長的過程,要勇于非貼壁依賴性細(xì)胞,此類細(xì)胞體外生長不需貼壁,可以采用微生物的方法在培養(yǎng)基中懸浮培養(yǎng).此類細(xì)胞培養(yǎng)可以選擇的相應(yīng)反應(yīng)器為:攪拌反應(yīng)器、中空纖維反應(yīng)器、陶質(zhì)矩形通道蜂窩狀反應(yīng)器、氣升式反應(yīng)器;另一類是貼壁培養(yǎng),指必須貼附在固體介質(zhì)表面上生長的細(xì)胞培養(yǎng),主要適用于貼壁依賴型細(xì)胞(亦稱貼壁型細(xì)胞),大多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞都屬于這一類型.這類細(xì)胞生長需要附著于某些帶適量正電荷的固體和半固體表面,細(xì)胞貼附生長后,不再是原有的形態(tài),一般呈單一化,主要有成纖維細(xì)胞型、上皮型、游走型和多形型等.此類細(xì)胞培養(yǎng)可以選擇的生物反應(yīng)器為:攪拌反應(yīng)器(微載體培養(yǎng))、玻璃珠床反應(yīng)器、中空纖維反應(yīng)器、陶質(zhì)矩形通道蜂窩狀反應(yīng)器等;再有一類是固定化培養(yǎng),這類培養(yǎng)既適用于貼壁依賴性細(xì)胞,又適用于非貼壁依賴性細(xì)胞的包埋培養(yǎng)方式,具有細(xì)胞生長密度高、抗剪切力和抗污染能力強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn).這一類細(xì)胞培養(yǎng)的生物反應(yīng)器選擇為:流化床反應(yīng)器、固化床反應(yīng)器等.
(三)植物細(xì)胞培養(yǎng)生物反應(yīng)器的選擇
植物細(xì)胞培養(yǎng)生物反應(yīng)器最初大多數(shù)采用微生物反應(yīng)器.由于植物細(xì)胞與微生物細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)不同,植物細(xì)胞較微生物細(xì)胞大,對(duì)氧需求小,對(duì)剪切力卻很敏感,因此不能像微生物培養(yǎng)那樣采用高剪切的攪拌,因而,混合顯得更重要.目前,由于植物細(xì)胞懸浮技術(shù)的發(fā)展,單細(xì)胞培養(yǎng)的成功加上各種新型生物反應(yīng)器的問世,使得植物細(xì)胞有可能像微生物那樣在發(fā)酵罐中大規(guī)模連續(xù)培養(yǎng).用于植物細(xì)胞培養(yǎng)的反應(yīng)器主要有攪拌式、非攪拌式及其他新型生物反應(yīng)器,另外還有植物細(xì)胞固定化反應(yīng)器和膜生物反應(yīng)器等.
總之,在選擇相應(yīng)的生物反應(yīng)器之前要了解該種細(xì)胞培養(yǎng)的特點(diǎn)及其注意事項(xiàng)來選擇相應(yīng)的反應(yīng)器.
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要哪些條件
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要哪些條件
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