cDNA文庫
以mRNA為模板,經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶催化,在體外反轉(zhuǎn)錄成cDNA,與適當(dāng)?shù)妮d體常用噬菌體或質(zhì)粒載體連接后轉(zhuǎn)化受體菌,則每個細(xì)菌含有一段cDNA,并能繁殖擴增,這樣包含著細(xì)胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合稱為該組織細(xì)胞的cDNA文庫.基因組含有的基因在特定的組織細(xì)胞中只有一部分表達(dá),而且處在不同環(huán)境條件、不同分化時期的細(xì)胞其基因表達(dá)的種類和強度也不盡相同,所以cDNA文庫具有組織細(xì)胞特異性.cDNA文庫顯然比基因組DNA文庫小得多,能夠比較容易從中篩選克隆得到細(xì)胞特異表達(dá)的基因.但對真核細(xì)胞來說,從基因組DNA文庫獲得的基因與從cDNA文庫獲得的不同,基因組.DNA文庫所含的是帶有內(nèi)含子和外顯子的基因組基因,而從cDNA文庫中獲得的是已經(jīng)過剪接、去除了內(nèi)含子的cDNA
基因組文庫
用限制性內(nèi)切酶切割細(xì)胞的整個基因組DNA,可以得到大量的基因組DNA片段,然后將這些DNA片段與載體連接,再轉(zhuǎn)化到細(xì)菌中去,讓宿主菌長成克隆.這樣,一個克隆內(nèi)的每個細(xì)胞的載體上都包含有特定的基因組DNA片段,整個克隆群體就包含基因組的全部基因片段總和稱為基因組文庫.
將某種生物的基因組DNA切割成一定大小的片段,并與合適的載體重組后導(dǎo)入宿主細(xì)胞進行克隆.這些存在于所有重組體內(nèi)的基因組DNA片段的集合,即基因組文庫,它包含了該生物的所有基因.