用的是兩種酶 一個有一個沒有不是很正常的么.要不然為啥是兩種酶.因為后來決定做TA克隆，但是之前一直用的Pfu酶，后來Taq酶P不出來，用Pfu來作對照，發(fā)現Taq酶P出來，而且是Taq能P出來，Pfu酶P不出來，跟別人出現的情況差異太大了哪種酶能P出來對你的實驗應該沒有影響吧也許是那管在室溫放的久了點 一般就是一種酶P不出來就換另一種試一下你是涂板之后菌P用Pfu沒條帶 還是TA克隆都是用PFU在做哦。。。我是在做TA克隆之前，P目的條帶，因為Pfu酶P出來的沒有加A，雖說有加A的方法，但是感覺效果不會很好，老師也要我盡量不要用太多的操作步驟。而且，關鍵是別人都是Taq酶能P出來，而Pfu酶P不出來，我的正好反了，貌似沒人出現過這種情況，分析半天找不出原因P出來就可以了 何必糾結原因呢只要測序啥的對了 不就皆大歡喜了 在試劑都沒有問題的情況下 這種事本來就找不到原因的 也許過幾天你P又是不一樣的結果