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  • SDS-PAGE跑了4、5回了,條帶顏色總是特別淺看不清楚,連MARKER都看不清楚,是怎么回事啊?

    SDS-PAGE跑了4、5回了,條帶顏色總是特別淺看不清楚,連MARKER都看不清楚,是怎么回事啊?
    連著練了好幾天了,每次都不出結(jié)果,
    用相同的樣品在別人制的膠上面跑出來就看的清楚,不知道制膠的時候什么最影響條帶深淺啊
    這兩天又跑了好幾次,沒有一次成功,都是條帶顏色淺。
    重新配制了分離膠緩沖液和濃縮膠緩沖液,APS也是新配的。樣品是昨天新制的,跑出來還是顏色淺,MARKER分別用了兩種,顏色都很淺。
    染色液是考馬斯亮藍,昨天也新配了。
    真不知道是什么原因了。
    有一點,我用別人的分離膠緩沖液的時候,分離膠跑1小時就到頭了,用我自己配的要跑1個半小時,不知道和條帶顏色淺有沒有關(guān)系,條帶形狀是正常的。
    其他人氣:991 ℃時間:2020-08-29 19:23:01
    優(yōu)質(zhì)解答
    1上樣量太少,或者電泳時候loading buffer不行,導致蛋白跑了
    2脫色時間不夠,建議K-G染色后,脫色液在30min內(nèi)換兩次
    3重新按標準配置電泳緩沖液.
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