western blot用來檢測蛋白表達的變化,而檢測表達變化的前提就是,你每個孔跑得總蛋白量是相同的,如果上樣量都不同,還怎么檢測不同組間目的蛋白量的區(qū)別,這樣內(nèi)參就可以作為檢測蛋白上樣量是否相同的標準.內(nèi)參一般選那...那是不是內(nèi)參曝光一次，樣品曝光一次呢？需要兩張膜？哎呀呀，我沒坐過western啊，東西都是文獻看的，但是很多不懂，導致文獻的圖都看不懂，求大神指教?。。】隙ㄊ窃谝粡埬ど献龅陌?。一般分這兩種情況：一個是目的蛋白和內(nèi)參蛋白的分子量相差較大，這個時候在轉(zhuǎn)膜之后，可以從中間剪開，然后分別雜抗體之后，再同時曝光。第二種情況是兩者分子量相差很小，很難剪開，畢竟轉(zhuǎn)膜之后還看不到蛋白。此時可以有兩個方法：一是先雜一個蛋白抗體，再雜另一個蛋白的抗體，然后再一起曝光；另一種是先做完一個蛋白到曝光完成，然后用一種特殊的試劑，可以把之前的抗原抗體復合物拉下來，然后在雜另外一個蛋白。