加入量和濃度有關(guān),只要知道每一個要加入物質(zhì)的濃度就可以算出來了:
模板的體積=25ng/模板的濃度 (這個值需要測定,如果實在不知道模板濃度,就加0.1-0.5ul左右吧)
引物的體積=0.5umol/1000uL * 10uL / 引物濃度 (根據(jù)自己配制的情況,有時候可能是100mM或者是200mM)
Taq酶體積= 0.5 U / Taq 酶活力單位濃度(標注在管子上,U/uL表示的數(shù)字)
Buffer的量應(yīng)該是1uL.(這里需要解釋一下,經(jīng)過確認,沒有1X的buffer,因為如果是1X的話,沒法加了,所以正確的應(yīng)該是10X的buffer,加入量就是稀釋10倍,所以10uL體系加1uLbuffer)