血球計數(shù)板是由一塊比普通載玻片厚的特制玻片制成的.玻片中有四條下凹的槽,構成三個平臺.中間的平臺較寬,其中間又被一短橫槽隔為兩半,每半邊上面,刻有一個方格網(wǎng).方格網(wǎng)上刻有9個大方格,其中只有中間的一個大方格為計數(shù)室,供微生物計數(shù)用.這一大方格的長和寬各為1mm,深度為0.1mm,其體積為0.1mm3.
計數(shù)室通常有兩種規(guī)格.一種是大方格內(nèi)分為16中格,每一中格又分為25小格;另一種是大方格內(nèi)分為25中格,每一中格又分為16小格.但是不管計數(shù)室是哪一種構造;它們都有一個共同的特點,即每一大方格都是由16×25=25×16=400個小方格組成.
血球計數(shù)板的使用
以計數(shù)酵母菌為例
(1)用血球計數(shù)板計數(shù)酵母菌懸液的酵母菌個數(shù).
(2)樣品稀釋的目的是便于酵母菌懸液的計數(shù),以每小方格內(nèi)含有4-5個酵母細胞為宜,一般稀釋10倍即可.
(3)將血球計數(shù)板用擦鏡紙擦凈,在中央的計數(shù)室上加蓋專用的厚玻片.
(4)將稀釋后的酵母菌懸液,用吸管吸取一滴置于蓋玻片的邊緣,使菌液緩緩滲入,多余的菌液用吸水紙吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球計數(shù)室內(nèi).
(5)計數(shù)時,如果使用16格×25格規(guī)格的計數(shù)室,要按對角線位,取左上,右上,左下,右下4個中格(即100個小格)的酵母菌數(shù).如果規(guī)格為25格×16格的計數(shù)板,除了取其4個對角方位外,還需再數(shù)中央的一個中格(即80個小方格)的酵母菌數(shù).
(6)當遇到位于大格線上的酵母菌,一般只計數(shù)大方格的上方和右方線上的酵母細胞(或只計數(shù)下方和左方線上的酵母細胞).
(7)對每個樣品計數(shù)三次,取其平均值,按下列公式計算每1ml菌液中所含的酵母菌個數(shù).