逆轉(zhuǎn)錄酶(reversetranscriptase)
又稱RNA指導(dǎo)的DNA聚合酶.是以RNA為模板合成DNA的酶.這種酶是1970年美國(guó)科學(xué)家特明(H.M.Temin)和巴爾的摩(D.Baltimore)分別于動(dòng)物致癌RNA病毒中發(fā)現(xiàn)的,他們并因此獲得1975年度諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng).當(dāng)RNA致癌病毒,如鳥類勞氏肉瘤病毒(Rous sar-coma virus)進(jìn)入宿主細(xì)胞后,其逆轉(zhuǎn)錄酶先催化合成與病毒RNA互補(bǔ)的DNA單鏈,繼而復(fù)制出雙螺旋DNA,并經(jīng)另一種病毒酶的作用整合到宿主的染色體DNA中,此整合的DNA可能潛伏(不表達(dá))數(shù)代,待遇適合的條件時(shí)被激活,利用宿主的酶系統(tǒng)轉(zhuǎn)錄成相應(yīng)的RNA,其中一部分作為病毒的遺傳物質(zhì),另一部分則作為mRNA翻譯成病毒特有的蛋白質(zhì).最后,RNA和蛋白質(zhì)被組裝成新的病毒粒子.在一定的條件下,整合的DNA也可使細(xì)胞轉(zhuǎn)化成癌細(xì)胞.
含有逆轉(zhuǎn)錄酶的病毒叫做反轉(zhuǎn)錄病毒,逆轉(zhuǎn)錄酶催化的反應(yīng)叫反轉(zhuǎn)錄(reve-rsetranscrip-tion).在這個(gè)過(guò)程中,遺傳信息流動(dòng)的方向是從RNA到DNA,正好與轉(zhuǎn)錄過(guò)程相反,故稱反轉(zhuǎn)錄.病毒逆轉(zhuǎn)錄酶含Zn2+,以脫氧核苷三磷酸為底物,從5’到3’合成DNA,反應(yīng)需要引物.這個(gè)酶在許多方面與DNA聚合酶相似.目前已發(fā)現(xiàn)不少動(dòng)物反轉(zhuǎn)錄病毒,近年來(lái)也發(fā)現(xiàn)了幾種人類反轉(zhuǎn)錄病毒.艾滋病毒也是一種反轉(zhuǎn)錄病毒.有的逆轉(zhuǎn)錄酶已提純,可作為合成某些特定RNA的互補(bǔ)DNA的工具酶,也可用于DNA的序列分析和克隆重組DNA.
逆轉(zhuǎn)錄酶的特點(diǎn)及其應(yīng)用
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