找了半天~給個(gè)最佳唄
1、低溫定期移植保藏法.將需要保藏的菌種接種在適宜的斜面培養(yǎng)基上,適溫培養(yǎng),當(dāng)菌絲健壯地長(zhǎng)滿斜面時(shí)取出,放在3-5℃低溫干燥處或4℃冰箱、冰柜中保藏,每隔4-6個(gè)月時(shí)間移植轉(zhuǎn)管一次,具體應(yīng)根據(jù)菌種特性決定.保藏時(shí)要注意環(huán)境溫度不能太高,以防霉菌通過(guò)棉塞進(jìn)入管內(nèi).因此,若用棉塞,可用干凈的硫酸紙或牛皮紙包扎棉塞,即可減少污染的機(jī)會(huì),也可防止培養(yǎng)基干燥.除草菇菌種外,其他食用菌菌種都能采用此法保藏.
　　2、液體石蠟保藏法.取化學(xué)純液體石蠟(要求不含水分、不霉變)裝于三角瓶中加棉塞并包紙,在1公斤/平方厘米壓力下滅菌1小時(shí),再放入40℃恒溫箱中數(shù)天,以蒸發(fā)其中水分,至石蠟油完全透明為止.將處理好的石蠟油移接在空白斜面上,28-30℃下培養(yǎng)2-3天,證明無(wú)雜菌生長(zhǎng)方可使用.然后用無(wú)菌操作的方法把液體石蠟注入待保藏的斜面試管中.注入量以高出培養(yǎng)基斜面1-1.5厘米,塞上橡皮塞,用固體石蠟封口,直立于低溫干燥處保藏.保藏時(shí)間在一年以上,在低溫下,保藏時(shí)間還可延長(zhǎng).
　　3、沙土管保藏法.取河沙用水浸泡洗滌數(shù)次,過(guò)60目篩除去粗粒,再用10%鹽酸浸泡2-4小時(shí),除去其中有機(jī)物質(zhì),再用水沖洗至流水的ph達(dá)到中性,烘干備用.同時(shí)取貧脊土或菜園土用水浸泡,使呈中性,沉淀后棄去上清液,烘干碾細(xì),用100目篩子過(guò)篩,將處理好的沙與土以(2-4):1混勻,用磁鐵吸出其中的鐵質(zhì),然后分裝小試管或安瓿內(nèi),每管裝量0.5-2克,塞棉塞,用紙包扎滅菌(1.5公斤/平方厘米,1小時(shí)),再干熱滅菌(160℃,2-3小時(shí))1-2次,進(jìn)行無(wú)菌檢驗(yàn),合格后使用.將已形成孢子的斜面菌種,在無(wú)菌條件下注入無(wú)菌水3-5毫升,刮菌苔,制成菌懸液,再用無(wú)菌吸管吸取菌液滴入砂土管中,以浸透砂土為止.將接種后的沙土管放入盛有干燥劑的真空干燥器內(nèi),接上真空泵抽氣數(shù)小時(shí),至沙土干燥為止.真空干燥操作需在孢子接入后48小時(shí)內(nèi)完成,以免孢子發(fā)芽.制備好的沙土管用石蠟封口,在低溫下可保藏2-10年.
　　4、濾紙片保藏法.取白色(收集深色孢子)或黑色(收集白色孢子)濾紙,剪成4×0.8厘米的小紙條,平鋪在培養(yǎng)皿中用紙包裹進(jìn)行滅菌(1公斤/平方厘米,30分鐘).采用鉤懸法收集孢子,讓孢子落在濾紙條上.將載有孢子的濾紙條放入保藏試管中,再將保藏試管放入干燥器中1-2天,除去濾紙水分,使濾紙水分含量達(dá)2%左右,然后低溫保藏.
　　5、自然基質(zhì)保藏法
　?、披溋１２胤ǎ喝o(wú)癟粒、無(wú)雜質(zhì)的小麥淘洗干凈,浸泡12-15小時(shí),加水煮沸15分鐘,繼續(xù)熱浸15分鐘,使麥粒脹而不破,瀝干水分?jǐn)傞_晾曬,使麥粒的含水量在25%左右.將碳酸鈣、石膏拌入熟麥粒中(麥粒、碳酸鈣、石膏比例為10公斤:133克:33克),拌和均勻后裝入試管中,每管約2-3克,然后清洗試管,塞棉塞,滅菌1.5(1.5公斤/平方厘米,2小時(shí)),經(jīng)無(wú)菌檢查合格后備用,試管基質(zhì)冷卻后接種,適溫培養(yǎng),待菌絲長(zhǎng)滿基質(zhì)后用石蠟涂封棉塞,放低溫保藏.2年左右轉(zhuǎn)接一次.
　?、汽熐２胤?取新鮮麩皮,過(guò)60目篩除去粗粒.將麩皮和自來(lái)水按1:1拌勻,裝入小試管,每管約裝1/3高度,加棉塞用紙包扎,高壓滅菌(1.5公斤/平方厘米,30分鐘),經(jīng)無(wú)菌檢查合格后備用,將生長(zhǎng)在斜面培養(yǎng)基上的健壯菌種,移種至無(wú)菌麩曲管中,移種時(shí)注意盡管搗勻小試管中的麩皮,呈疏松狀態(tài),在適溫下培養(yǎng)至菌絲長(zhǎng)滿麩皮為止,將麩曲小管置干燥器中,在低溫或適溫下保藏.
　　6、生理鹽水保藏法.取純氯化鈉0.7-0.9克,放入100%毫升蒸餾水中,攪拌均勻分裝試管,每管5-10毫升,進(jìn)行滅菌(1公斤/平方厘米,30分鐘),經(jīng)無(wú)菌檢查合格后備用,將待保藏的菌種接入馬鈴薯葡萄糖液體培養(yǎng)基中適溫振蕩培養(yǎng)5-7天.無(wú)菌操作吸取少許培養(yǎng)菌種注入經(jīng)檢驗(yàn)合格的生理鹽水試管中,塞上無(wú)菌橡皮塞,用石蠟涂封,在室溫或低溫保藏.
　　7、冷凍真空干燥法.將已培養(yǎng)、生長(zhǎng)豐富的菌體或孢子懸浮于滅菌的血清、卵白、脫脂奶制成菌懸液,將懸液以無(wú)菌操作分裝于滅菌的玻璃安瓿瓶中,每管約0.3-0.5毫升,然后用耐壓橡皮管與冷凍干燥裝置連接,安瓿瓶放在冷凍槽中于-30℃至-40℃迅速冷凍,并在冷凍狀態(tài)下抽空干燥,并在真空狀態(tài)下熔封安瓿,在-20℃保存,一般可保存十年以上,但成本較高.
　　8、液氮超低溫保藏法.首先將要保藏的菌種制成菌懸液備用；其次,準(zhǔn)備安瓿瓶,每瓶加入0.8毫升冷凍保護(hù)劑10%(體積比)甘油蒸餾水溶液,塞棉塞滅菌(1公斤/平方厘米,5分鐘).無(wú)菌檢查后,接入要保藏的菌種,火焰熔封瓶口,檢查是否漏氣,將封好口的安瓿瓶放在凍結(jié)器內(nèi),以每分鐘下降1℃的速度緩慢降溫,使保藏品逐步均勻地凍結(jié),直至-35℃,以后凍結(jié)速度就不需控制,安瓿凍結(jié)后立即放入液氮罐內(nèi),在-150至-196℃保藏,該法只有少數(shù)科研院所使用.