不可以.因為革蘭氏碘液（媒染劑）的作用是增加結(jié)晶紫染料和細(xì)胞之間的親和性或附著力,即以某種方式幫助染料固定在細(xì)胞上,使不易脫落.改變順序可能會對效果有影響,所以最好按步驟做.
脫色后復(fù)染前,理論上革蘭氏陽性菌呈紫色,陰性菌無色.復(fù)染的目的就是增加無色陰性菌與背景的反差,以便區(qū)別于紫色的陽性菌
革蘭氏陽性菌細(xì)胞壁厚,肽聚糖網(wǎng)狀分子形成一種透性障,當(dāng)乙醇脫色時,肽聚糖脫水而孔障縮小,故保留結(jié)晶紫-碘復(fù)合物在細(xì)胞膜上.呈紫色.
革蘭氏陰性菌肽聚糖層薄,交聯(lián)松散,乙醇脫色不能使其結(jié)構(gòu)收縮,其脂含量高,乙醇將脂溶解,縫隙加大,結(jié)晶紫-碘復(fù)合物溶出細(xì)胞壁,番紅復(fù)染后呈紅色.
革蘭氏染色步驟：
1.涂片,火焰固定
2.結(jié)晶紫1min,使菌體著上紫色
3.水洗
4.碘液1min,碘和結(jié)晶紫形成脂溶性大分子復(fù)合物,分子大,能被細(xì)胞壁阻留在細(xì)胞內(nèi)
5.水洗
6.酒精脫色30s,細(xì)胞壁成分和構(gòu)造不同,出現(xiàn)不同的反應(yīng).
7.水洗
8.番紅復(fù)染1min,增加脫色菌與背景的反差并區(qū)別于未脫色菌.
9.以吸水紙吸干,油鏡觀察