一般純度鑒定都是針對(duì)一個(gè)基因或一個(gè)區(qū)域的,這時(shí),針對(duì)目標(biāo)位置設(shè)置一對(duì)SSR引物即可.對(duì)于沒(méi)有設(shè)定特定位點(diǎn)的檢測(cè),因?yàn)樵谝粋€(gè)位置可能是一個(gè)純度,但不代表另一個(gè)位置也是這個(gè)純度,此時(shí),當(dāng)然是多用SSR引物對(duì)了.GB/T20396-2006說(shuō)的選用12對(duì)引物，這12對(duì)引物同時(shí)加入一個(gè)PCR管，還是只能一對(duì)加入一個(gè)PCR管，如果是12對(duì)那么一粒種子就要做12個(gè)PCR管？應(yīng)該是一個(gè)PCR管加一對(duì)引物！其實(shí)對(duì)于檢測(cè)來(lái)說(shuō)，做12個(gè)PCR也不算麻煩，畢竟只是個(gè)PCR時(shí)間--僅幾個(gè)小時(shí)的事情。 我所見(jiàn)過(guò)的混合PCR，也僅是多至3對(duì)引物而已! 如果引物太多，一是整個(gè)PCR微環(huán)境變得復(fù)雜，可能達(dá)不到單個(gè)引物擴(kuò)增時(shí)的效果，二是那么多的條帶，看得人眼花繚亂也不好判斷。這樣算來(lái)，對(duì)于雜交水稻至少取200粒種子，每粒種子提取DNA后都要分別用12個(gè)PCR管，每個(gè)PCR管加一對(duì)引物，一共2400個(gè)PCR管，2400對(duì)引物，每個(gè)PCR管還要標(biāo)明是哪一粒種子，如果有兩個(gè)位點(diǎn)不同就是雜株。如果是200粒種子，確實(shí)要2400個(gè)PCR管，但不是2400對(duì)引物，還是12對(duì)引物： 第一對(duì)引物：擴(kuò)200個(gè) 第二對(duì)引物：擴(kuò)200個(gè)……第十二對(duì)引物：200個(gè)