F:5‘-GTAGATGGACTTATGCCG-3’ Tm:47.8℃ 評(píng)分100
R:5'-GACTTCGACTACACTGCAC-3' Tm:47.2℃ 評(píng)分86 總體85分
正反引物有接近3‘端的交叉引物二聚體
反引物有接近3’端的引物二聚體
F:5‘-GTAGATGGACTTATGCCGTC-3’ Tm:52.2℃ 93分
R:5'-GACTTCGACTACACTGCACG-3' Tm“53.6℃ 86分 總體79分
正引物有3‘端發(fā)卡(貌似不嚴(yán)重),正反引物分別有引物二聚體和交叉引物二聚體
兩組都訂了試試看吧~我覺(jué)得第一組好一些,但是就是Tm有點(diǎn)低.
使用primer premier 5 設(shè)計(jì)的
歡迎追問(wèn),我也可以把設(shè)計(jì)結(jié)果圖發(fā)給你~真是謝謝哦!我也是用 premier 5 設(shè)計(jì),但是引物都不是從第一個(gè)堿基開始的。估計(jì)我使用軟件或者設(shè)置參數(shù)的有問(wèn)題。那麻煩你把圖發(fā)給我看看吧!tclzdlw@163.com。謝謝啦!已發(fā)送,請(qǐng)查收~~關(guān)于設(shè)置參數(shù)的問(wèn)題你可以繼續(xù)問(wèn)我啊,或者我怎么樣詳細(xì)給你講一下我使用的就是search的功能,那么我要如何設(shè)置參數(shù)才能得到你這樣的結(jié)果呢?萬(wàn)分感謝!
設(shè)計(jì)擴(kuò)增以下基因的引物,并給出PCR反應(yīng)的參數(shù).
設(shè)計(jì)擴(kuò)增以下基因的引物,并給出PCR反應(yīng)的參數(shù).
基因序列如下:
5'-GTAGATGGACTTATGCCGTCCCGGTGACTCCTGGAATAATCGTCCATCCACTCTAAATCAGTTACGGCCTTATCCGCAGGAGTTGAAGTACAAAGGATGTATGATTCGAGGCTTACGGAGTAGAGATGTTCATTTTTCCAGCTTTCAATGGTCTCATGACACATGAGGGACTCGATGGGAAACTCAGGTGTGTAAGTGCTAACTGGGTCTGGGAATAGATGGCGTGCAGTGTAGTCGAAGTC-3’
基因序列如下:
5'-GTAGATGGACTTATGCCGTCCCGGTGACTCCTGGAATAATCGTCCATCCACTCTAAATCAGTTACGGCCTTATCCGCAGGAGTTGAAGTACAAAGGATGTATGATTCGAGGCTTACGGAGTAGAGATGTTCATTTTTCCAGCTTTCAATGGTCTCATGACACATGAGGGACTCGATGGGAAACTCAGGTGTGTAAGTGCTAACTGGGTCTGGGAATAGATGGCGTGCAGTGTAGTCGAAGTC-3’
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