RNA提取中加入氯仿和異丙醇的原因
RNA提取中加入氯仿和異丙醇的原因
生物人氣:280 ℃時(shí)間:2020-05-02 23:51:24
優(yōu)質(zhì)解答
氯仿的作用有多個(gè)方面,一是作為有機(jī)溶劑變性蛋白,使其沉淀并通過離心除去,同時(shí)也通過變性作用抑制RNase活性;二是RNA提取試劑中通常含有苯酚(Trizol主要成分就是苯酚,很多自己配試劑提的方法也用苯酚,抽提蛋白時(shí)也會(huì)用到苯酚),苯酚微溶于水,抽提烷之后水相里有痕量的酚,如果不除去會(huì)損傷核酸,需要通過氯仿把水相里參與的苯酚抽提掉;三是作為溶劑抽提樣品中的一些脂溶性雜質(zhì)(比如油脂、脂溶性色素等),起到一定除雜作用
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