梯度洗脫（gradient elution）又稱為梯度淋洗或程序洗脫.在同一個分析周期中,按一定程度不斷改變流動相的濃度配比,稱為梯度洗脫.
梯度洗脫的原理：流動相由幾種不同極性的溶劑組成,通過改變流動相中各溶劑組成的比例改變流動相的極性,使每個流出的組分都有合適的容量因子k,并使樣品種的所有組分可在最短時間內(nèi)實現(xiàn)最佳分離.
梯度洗脫特點：提高柱效,改善檢測器的靈敏度.當(dāng)樣品中的一個峰的k值和最后一個峰的k值相差幾十倍至幾百倍時,使用梯度洗脫效果特別好.梯度洗脫中為保證流速的穩(wěn)定,必須使用恒流泵,否則難獲重復(fù)結(jié)果.梯度洗脫常用一個弱極性的溶劑A和一個強(qiáng)極性的溶劑B.
如：在60min內(nèi),流動相配比從甲醇：水=1：99到甲醇：水=100：0