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  • 如何利用OD260:OD280比值鑒定蛋白純度是否被核酸污染?

    如何利用OD260:OD280比值鑒定蛋白純度是否被核酸污染?
    其他人氣:154 ℃時(shí)間:2020-04-19 11:22:11
    優(yōu)質(zhì)解答
    當(dāng)?shù)鞍字袚饺肓撕怂嶂?后,OD260:OD280比值變化很明顯,尤其是純的蛋白制品中摻入了一點(diǎn)點(diǎn)核酸后,變化最明顯.例如:純的蛋白樣品,其OD260:OD280比值為 0.57,而摻入5%的核酸之后,該筆直上升到了1.06.
    但是反過來卻是不成立的,即:這個(gè)比值不能用來指示核酸被蛋白污染的程度.因?yàn)楹怂嵩?60nm和280nm處的消光系數(shù)比蛋白質(zhì)高 很多,即使有明顯的蛋白污染也不會(huì)大幅度改變核酸溶液的OD260:OD280比值.例如,純的核酸的OD260:OD280比值是2.0,當(dāng)摻入了5% 的蛋白質(zhì)污染之后,OD260:OD280比值變成1.99,摻入20%的蛋白質(zhì)污染后,也才變成1.96.這就說明這個(gè)比值用來指示核酸被蛋白污染的程 度是非常不靈敏的.
    從下面這個(gè)表中就可以明顯看出來.
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