合成公司交給你的引物成品一般是會注明有幾個OD.正常一管引物干粉都是1個OD,相當(dāng)于33μg.
因?yàn)橐锶芤簼舛纫话阋笫?0μmol/L,所以首先要計(jì)算引物的摩爾數(shù),堿基平均分子量324.5,如果你的引物長度是n,那么引物摩爾數(shù)就是33÷n÷324.5.
比如你的引物長度是24個bp,摩爾數(shù)就是33÷24÷324.5=4.2nmol,也就是說要加入420μL的雙蒸水就能配成10μmol/L的引物溶液.
加入水前記得先要在離心機(jī)上把引物管5000轉(zhuǎn)以上轉(zhuǎn)2分鐘,把干粉都甩到底部,以免打開的時候飄散.