激素母液的配制
各種生長素和細(xì)胞分裂素要單獨(dú)配制,不能混合在一起,生長素類一般要先用少量95%的酒精或1當(dāng)量的NaOH溶解,細(xì)胞分裂素一般要先用1當(dāng)量的鹽酸溶解,然后再加蒸餾水定容.一般取100mg配成100ml母液.
2、配制培養(yǎng)基
以配置1L MS培養(yǎng)基為例,按順序進(jìn)行如下操作：
1、先在燒杯中放入一些蒸餾水.
2、分別取MS中的母液10ml倒入.
3、一般稱取30g蔗糖倒入,攪拌溶解.
4、加蒸餾水用量筒定溶至1L.
5、按設(shè)計好的方案添加各種激素,由于激素的用量很小,而且激素對組培植物的生長至關(guān)重要.所以有條件的話最好用微量可調(diào)移液器吸取,減少誤差.
6、用精密試紙或酸度計調(diào)整PH至5.7-5.8.（有條件的話使用酸度計,比較精確） 可配1當(dāng)量的HCL和1當(dāng)量的NaOH用來調(diào)溶液PH值.
1當(dāng)量HCL配制：用量筒量取8.3ml配成100ml溶液.
1當(dāng)量NaOH配制：稱取NaOH 4g 配成100ml溶液.
7、稱取5g左右瓊脂粉（質(zhì)量好的瓊脂粉),倒入上面配好的溶液中,放在電爐上加熱至沸騰,直到瓊脂粉熔化.
8、稍微冷卻后,分裝入培養(yǎng)容器中.無蓋的培養(yǎng)容器要用封口膜或牛皮紙封口,用橡皮筋或繩子扎緊.
9、放入消毒滅菌鍋滅菌,滅菌20分鐘左右.
10、滅菌后從滅菌鍋中取出培養(yǎng)基,平放在實(shí)驗臺上令其冷卻凝固.
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