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  • 老師,我想做標(biāo)準(zhǔn)曲線驗(yàn)證一下擴(kuò)增效率,知道rna的濃度,怎么換算成拷貝數(shù),有人說(shuō)起碼要知道bp數(shù),

    老師,我想做標(biāo)準(zhǔn)曲線驗(yàn)證一下擴(kuò)增效率,知道rna的濃度,怎么換算成拷貝數(shù),有人說(shuō)起碼要知道bp數(shù),
    我又不是做的質(zhì)粒,就是提取標(biāo)本的rna,然后想倍比稀釋做一下曲線,這個(gè)bp又是誰(shuí)的bp呢,ABI7300的標(biāo)準(zhǔn)品要輸入拷貝數(shù),我輸入RNA的濃度可以嗎
    數(shù)學(xué)人氣:914 ℃時(shí)間:2020-07-05 19:30:27
    優(yōu)質(zhì)解答
    你這個(gè)情況不需要知道拷貝數(shù)目.把樣品等比例稀釋,比如1:4,或者1:10. 至少做4-5個(gè)點(diǎn).PCR后按照相對(duì)濃度和擴(kuò)增的Ct值做曲線,就可以得到擴(kuò)增效率了.
    如果要知道拷貝數(shù)目,必須有已知濃度的含有該序列的質(zhì)粒來(lái)作為批準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線.可是,老師,7300做曲線有一步需要輸入濃度,我能直接輸入RNA濃度嗎單位是ng/ul,這個(gè)數(shù)值機(jī)器默認(rèn)嗎,平時(shí)看著他們都是輸?shù)目截悢?shù),如果擴(kuò)增后根據(jù)ct值自己是不是也可以手工畫(huà)曲線,我三種不同樣本,但是檢測(cè)同一個(gè)基因,每種標(biāo)本還需要各自做曲線?可以輸入相對(duì)濃度,比如1, 0.5, 0.25。。。。也可以根據(jù)CT值自己畫(huà)曲線,用EXCEL同一個(gè)基因只要做一次
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