物鏡利用入射光線透過時被檢物體進(jìn)行第一次成像,得到物體放大的實(shí)像；目鏡的作用是把物鏡放大了的實(shí)像進(jìn)行第二次放大,是將物鏡放大的實(shí)像作為物體,進(jìn)一步放大成虛像并把物像映入觀察者的眼中.
顯微鏡的分辨率是指能被顯微鏡清晰區(qū)分的兩個物點(diǎn)的最小間距.根據(jù)衍射理論,顯微物鏡的分辨率為
sigma=0.61lamda/N.sinU 1式中l(wèi)amda為所用光波的波長；N 為物體所在空間的折射率,物體在空氣中時N=1；U為孔徑角,即從物點(diǎn)發(fā)出能進(jìn)入物鏡成像的光線錐的錐頂角的半角;NsinU 稱為數(shù)值孔徑.當(dāng)波長λ一定時,分辨率取決于數(shù)值孔徑的大小.數(shù)值孔徑越大則能分辨的結(jié)構(gòu)越細(xì),即分辨率越高.數(shù)值孔徑是顯微物鏡的一個重要性能指標(biāo),通常與放大倍率一起標(biāo)注在物鏡鏡筒外殼上,例如40×0.65表示物鏡的放大倍率為40倍,數(shù)值孔徑為0.65.
分辨率和放大倍率是兩個不同的但又互有聯(lián)系的概念.當(dāng)選用的物鏡數(shù)值孔徑不夠大,即分辨率不夠高時,顯微鏡不能分清物體的微細(xì)結(jié)構(gòu),此時即使過度地增大放大倍率,得到的也只能是一個輪廓雖大但細(xì)節(jié)不清的圖像.這種過度的放大倍率稱為無效放大倍率.