1)動物的選擇,一般用小鼠,其繁殖能力強(qiáng),易于飼養(yǎng).我們常用的是它們的骨髓細(xì)胞和精巢,因其分裂指數(shù)較高,不用體外培養(yǎng)就可以得到分裂中期的細(xì)胞.
2)秋水仙素用量要注意,太多或處理時間過長,會導(dǎo)致染色體的過分凝縮或著絲點裂解,最終會引起染色體形態(tài)不正常,甚至被破壞或溶解.
3) 低滲處理很關(guān)鍵.低滲液的量、處理時間均與細(xì)胞的數(shù)量有關(guān).低滲過度,細(xì)胞會破裂；低滲不足則染色體在一起,分散不開.
4) 離心速度或離心時間也能影響染色體標(biāo)本的制備.離心速度過大或離心時間過長,則會引起細(xì)胞破裂；反之,離心速度過小或離心時間過短,則細(xì)胞沉降不下來,則會引起大量細(xì)胞的丟失.
5) 固定液要隨用隨配,固定徹底后再打散細(xì)胞團(tuán)塊,否則細(xì)胞容易破碎,染色體分散亦受到影響.
6) 載玻片要預(yù)冷.冷卻不夠,則會影響染色體的附著和鋪展.
7) 用吸管吹散細(xì)胞時用力必須盡量輕柔,用力過大則會造成細(xì)胞破裂,而染色體也會彌散在溶液中,在隨后的離心中將會丟失.
8) 滴片時的高度很重要,高度過低細(xì)胞不會破裂；過高則染色體過于分散甚至丟失,無法辨別出染色體的準(zhǔn)確數(shù)量.