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  • 使用顯微鏡應特別注意的幾個問題

    使用顯微鏡應特別注意的幾個問題
    其他人氣:985 ℃時間:2020-06-05 17:40:48
    優(yōu)質解答
    光學顯微鏡的使用注意事項
    (一) 顯微鏡的構造及各部名稱
    關于顯微鏡的結構與使用方法已于生物學和組織胚胎學課程中學過,在寄生蟲學的學習中,要求進一步熟練使用.顯微鏡的構造及各部名稱見圖1.
    (二) 顯微鏡的使用
    利用自然光源鏡檢時,最好用朝北的光源,不宜3采用直射陽光;利用人工光源時,宜用日光燈的光源.
    鏡檢時身體要正對實習臺,采取端正的姿態(tài),兩眼自然張開,左眼觀察標本,右眼觀察記錄及繪圖,同時左手調節(jié)焦距,使物象清晰并移動標本視野.右手記錄、繪圖.
    鏡檢時載物臺不可傾斜,因為當在五套載物臺傾斜時,液體或油易流出,既損壞了標本,又污染載物臺,也影響檢查結果.
    鏡檢時應將標本按一定方向移動視野,直至整個標本觀察完畢,以便不漏檢,不重復.
    顯微鏡的重光為對光,接物鏡的轉換及光線的調節(jié).觀察寄生蟲標本時,光線調節(jié)甚為重要.因為所觀察的標本如蟲卵、包囊等,均為自然光狀態(tài)的物體,有大有小,色澤有深有淺,有的無色透明,而低倍、高倍接物鏡轉換較多,故須隨著鏡檢時對不同標本和要求,需要隨時調節(jié)焦距和光線,這樣才能使觀察的物象清晰.在一般情況下,染色標本光線宜強,無色或未染色標本光線宜弱;低倍鏡觀察光線宜弱,高倍鏡觀察光線宜強.
    1. 對光:
    (1)將低倍鏡轉至鏡筒下方與鏡筒成一直線.
    (2)撥動反光鏡,調節(jié)至視野最亮無陰影.反光鏡有平、凹兩面,光源強時用平面,較暗時用凹面,需要強光時,將聚光器提高,光圈放大;需要弱光時,將聚光器降低,或光圈適當縮小.
    (3)將待觀察的標本置載物臺上,轉動粗調節(jié)器使鏡筒下降至接物鏡接近標本.于轉動粗調節(jié)器的同時,須俯身在鏡旁仔細觀察接物鏡與標本之間的距離.
    (4)左眼于接目鏡觀察,同時左手轉動粗調節(jié),使鏡筒徐徐上升以調節(jié)焦距,使視野內的物象看到上時即停,再調微調節(jié)器,至標本清晰為止.
    2. 接物鏡的使用及光線的調節(jié):
    顯微鏡一般具有三個接物鏡,即低倍、高倍及油鏡,固定于接物鏡轉換盤孔中.觀察標本時,先使用低倍接物鏡,此時,視野較大,標本較易查出,但放大倍數(shù)較?。ㄒ话惴糯?00倍),較小的物體不易觀察其結構.高倍接物鏡放大的倍數(shù)較大(一般放大400倍),能觀察微小的物體或結構.
    寄生蟲的蠕蟲卵,微絲蚴,原蟲的滋養(yǎng)體及包囊,昆蟲的幼蟲,均使用低、高倍鏡.組織細胞內的原蟲,則使用油鏡.使用低、高倍鏡觀察,如在低倍鏡下不能準確鑒定所見的物體或其內部構造時,則轉高倍鏡觀察.使用油鏡觀察,一般加一滴油后直接將油鏡頭浸入油滴中進行鏡檢觀察.
    3. 低倍、高倍、油鏡頭的識別:
    (1)標明放大倍數(shù)10×,40×,100×,或10/0.25,40/0.65,100/1.30.
    (2)低倍鏡最短,高倍鏡較長,油鏡最長.
    (3)鏡頭前面的鏡孔低倍鏡最大,高倍鏡較大,油鏡最小.
    (4)油鏡頭上常刻有黑色環(huán)圈,或“油”字.
    4. 低倍鏡換高倍鏡的使用方法:
    (1)光線對好后,移動推進器尋找需要觀察的標本.
    (2)如標本的體積較大,不能清楚查見其構造因而不能確認時,則將標本移至視野中央,再旋轉高倍接物鏡于鏡筒下方.
    (3)旋轉微調節(jié)器至物象清晰為止.
    (4)調節(jié)聚光器及光圈,使視野內的物象達到最清晰的程度.
    5. 油鏡的使用方法:
    (1)原理:使用油鏡觀察時,需加香柏油,因為油鏡需要進入鏡頭的光線多,但油鏡的透氣孔最小,這樣進入的光線就少,物體不易看清楚.同時又因自玻片透過的光線,由于介質(玻片-空氣-接物鏡)密度(玻片:n=1.52,空氣:n=1.0)不同而發(fā)生了折射散光,因此射入鏡頭的光線就更少,物體更看不清楚.于是采用一種和玻片折光率相接近的介質如香柏油,加于標本與玻片之間,使光線不通過空氣,這樣射入鏡頭的光線就較多,物象就看得清楚(圖2).
    (2)油鏡的使用:
    a.將光線調至最強程度(聚光器提高,光圈全部開放).
    b.轉動粗調節(jié)器使鏡筒上升,滴香柏油1小滴(不要過多,不要涂開)于接物鏡正下方標本上.
    c.轉動接物鏡轉換盤,使油鏡頭于鏡筒下方.
    d.俯身鏡旁側面在肉眼的觀察下,轉動粗調節(jié)器使油鏡頭徐徐下降浸入香柏油內,輕輕接觸玻片為止.
    e.慢慢轉動粗調節(jié)器,使油鏡頭徐徐上升至見到標本的物象為止.
    f.轉動微調節(jié)器,使視野物象達到最清晰的程度.
    g.左手徐徐移動推進器,并轉動微調節(jié)器以觀察標本.
    h.標本觀察完畢后,轉動粗調節(jié)器將鏡筒升起,取下標本玻片.立即用擦鏡紙將鏡頭上的香柏油擦凈.
    6. 注意事項:
    (1)使用顯微鏡之前,應熟悉顯微鏡的各部名稱及使用方法,特別應掌握識別三種接物鏡之特征.
    (2)寄生蟲學實習中所觀察的標本,大多數(shù)為無色和顏色較淺,因此必須注意光線的調節(jié).
    (3)新鮮標本觀察時,須加蓋玻片,以免標本因蒸發(fā)而干燥變形或污染侵蝕接物鏡,同時可使標本表面勻平,光線得以集中,有利于觀察.
    (三) 顯微鏡的保養(yǎng)
    圖3 加用蓋玻片后,標本表面勻平,光線得以集中,便于檢查示意圖
    1.顯微鏡在從木箱中取出或裝箱時,右手緊握鏡臂,左手穩(wěn)托鏡座,輕輕取出.不要只用一只手提取,以防顯微鏡墜落,然后輕輕放在實習臺上或裝 入木箱內.
    2.顯微鏡放到實習臺上時,先放鏡座的一端,再將鏡座全部放穩(wěn),切不可使鏡座全面同時與臺面接觸,這樣震動過大,透鏡和微調節(jié)器的裝置易損壞.
    3.顯微鏡須經(jīng)常保持清潔,勿使油污和灰塵附著.如透鏡部分不潔時,用擦鏡紙輕擦,如有油污,先將擦鏡紙蘸少許二甲苯拭去.
    4.顯微鏡不能在陽光下暴曬和使用.
    5.接目鏡和接物鏡不要隨便抽出和卸下必須抽取接目鏡時,須將鏡筒上口凈用布遮蓋,避免灰塵落入鏡筒內.更換接物鏡時,卸下后應倒置在清潔的臺面下,并隨即裝入木箱的置放接物鏡的管內.
    6.顯微鏡用完后,取下標本片,經(jīng)聚光器降下,再將物鏡轉成“八”字形,轉動粗調節(jié)器使鏡筒下降,以免接物鏡與聚光器相碰.
    7.顯微鏡應放在干燥的地方,以防生霉.
    二、體視顯微鏡的使用
    體視顯微鏡能獲得立體感覺,其原理是由于通過兩個接目鏡對物體從不同的方向在人眼的網(wǎng)膜上形成的象而產(chǎn)生的.本顯微鏡具有傾斜成45°的雙筒,通過雙筒可以觀察到寬廣視野中正立的具有立體感的物象.其中右側接目鏡筒上有視度調節(jié)圈的位置,如觀察者雙眼視度具有差異,可以先調節(jié)顯微鏡使左眼成像清晰,然后旋轉右側視度調節(jié)圈至右眼成像清晰.雙筒可以在一定角度內相對地轉動以適應工作者兩眼間距離.本顯微鏡的工作距離為100mm,在方形鏡身兩側有手輪可旋轉,利用它的轉動可在不變更工作距離情況下更換顯微鏡放大倍數(shù).顯微鏡總放大倍數(shù)的讀數(shù),在使用25×接目鏡時,以右側數(shù)盤上數(shù)字為準,而使用6.3×接目鏡時,則以左側數(shù)盤上的數(shù)字為準.
    三、其它儀器器材的使用與保養(yǎng)
    除顯微鏡、體視顯微鏡以外,寄生蟲學實習課用的器材、儀器尚有許多,在此我們不一一贅述,每次實習課輔導教師將向我們介紹,這里僅將這些儀器、器材分類別略作一些使用原理的介紹.
    (一)玻璃儀器、器材:使用時輕拿輕放,防止破碎,用畢應清洗干凈、涼干、烘干以防生霉.
    (二)金屬儀器、器材:勿接觸或少接觸酸性、堿性物品,用畢應洗刷、擦凈、涼干、烘干以防腐蝕生銹.
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