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  • 果蠅基因組DNA提取,乙醇沉淀后大量鹽析出,為什么呢?

    果蠅基因組DNA提取,乙醇沉淀后大量鹽析出,為什么呢?
    10只果蠅基因組提取得到的300ul上清液(基因組粗提物溶于100mM TrisHCl,50mM NaCl,100mMEDTA,1%SDS后熱處理再離心),過了兩遍酚氯仿異戊醇后,再過氯仿.取上清,加入0.1體積3M NaAc和2.5體積無水乙醇,液體整個立即呈現(xiàn)大量云霧狀,-20度凍半小時離心,得到的沉淀多的嚇人,用槍頭捅一下沉淀后感覺像是很多鹽顆粒.
    其他人氣:152 ℃時間:2020-06-02 12:34:35
    優(yōu)質(zhì)解答
    太正常了,你DNA溶液里加了高鹽,又在低溫下用醇沉淀,鹽肯定跟著DNA一起沉下來.
    沒什么問題,把沉淀用70%乙醇洗滌除鹽,再離心去上清.此時的沉淀晾干后用水溶就可以了.
    看樣子你是新手,抽提DNA的經(jīng)典步驟上都有用70%乙醇洗滌DNA沉淀這一部的.但是洗不掉,鹽太多了DNA沉淀溶解后測OD260/OD280,看看是否有蛋白污染。
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