1、土樣采集：取10cm左右深層土壤10g備用. 
2、制備土壤稀釋液：稱取土壤1g,放入有99mL無菌水的三角瓶中,振蕩均勻,即為稀釋10－2的土壤懸液.然后進(jìn)行十倍梯度稀釋,依次制備 10－3、10－4、10－5
、10－6 、10－7 稀釋度的土壤稀釋液.                                                  3、培養(yǎng)基平板制備：按培養(yǎng)基配方各配置牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基、馬丁氏培養(yǎng)基、高氏Ⅰ號培養(yǎng)基各100ml.滅菌后分別倒3個平板.（高氏Ⅰ號培養(yǎng)基滅菌前加入10滴10%苯酚；馬丁氏培養(yǎng)基倒平板前加入2ml去氧膽酸鈉(2%)和0.4ml 1萬單位/ml鏈霉素） 
4、接種：用無菌吸管吸取0.1ml相應(yīng)濃度土壤稀釋液,以無菌操作技術(shù)接種在平板上,涂布均勻.細(xì)菌選用10－4、10－5、10－6 三個稀釋度接種于牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基,放線菌與霉菌選用10－2  、10－3、10－4 三個稀釋度,分別接種于高氏Ⅰ號培養(yǎng)基、馬丁氏培養(yǎng)基.（一個稀釋度一個平板） 
5、培養(yǎng)：細(xì)菌平板于37℃恒溫培養(yǎng)1～2d,放線菌于30℃培養(yǎng)2～3d,霉菌于30℃培養(yǎng)3～5d ,觀察. 
6、計數(shù)：用稀釋水樣檢測平板的菌落計數(shù)方法進(jìn)行計數(shù),報告細(xì)菌總數(shù)/(CFU·ml-1) 
7、純化：挑取典型菌落接種于相應(yīng)平板,培養(yǎng)條件同上,培養(yǎng)純化.