一、植物組織蛋白質(zhì)提取方法
1、根據(jù)樣品重量（1g樣品加入3.5ml提取液,可根據(jù)材料不同適當(dāng)加入）,準(zhǔn)備提取液放在冰上.
2、把樣品放在研缽中用液氮研磨,研磨后加入提取液中在冰上靜置（3-4小時）.
3、用離心機(jī)離心8000rpm40min4℃或11100rpm20min4℃
4、提取上清夜,樣品制備完成.
蛋白質(zhì)提取液：300ml
1、1Mtris-HCl（PH8） 45ml
2、甘油（Glycerol）75ml
3、聚乙烯吡咯烷酮（Polyvinylpolypyrrordone）6g
這種方法針對SDS-PAGE,垂直板電泳!
二、植物組織蛋白質(zhì)提取方法
三氯醋酸—丙酮沉淀法
1、在液氮中研磨葉片
2、加入樣品體積3倍的提取液在-20℃的條件下過夜,然后離心（4℃8000rpm以上1小時）棄上清.
3、加入等體積的冰浴丙酮（含0.07%的β-巰基乙醇）,搖勻后離心（4℃8000rpm以上1小時）,然后真空干燥沉淀,備用.
4、上樣前加入裂解液,室溫放置30分鐘,使蛋白充分溶于裂解液中,然后離心（15℃8000rpm以上1小時或更長時間以沒有沉淀為標(biāo)準(zhǔn)）,可臨時保存在4℃待用.
5、用Brandford法定量蛋白,然后可分裝放入-80℃?zhèn)溆?
藥品：
提取液：含10%TCA和0.07%的β-巰基乙醇的丙酮
裂解液：2.7g尿素0.2gCHAPS溶于3ml滅菌的去離子水中（終體積為5ml）,使用前再加入1M的DTT65ul/ml.
這種方法針對雙向電泳,雜質(zhì)少,離子濃度小的特點!當(dāng)然單向電泳也同樣適用,只是電泳的條帶會減少!