定量PCR法中,Taqman探針?lè)ㄐ枰鋈芙馇€嗎?為什么?
定量PCR法中,Taqman探針?lè)ㄐ枰鋈芙馇€嗎?為什么?
生物人氣:212 ℃時(shí)間:2020-05-26 07:33:10
優(yōu)質(zhì)解答
正常情況下是不需要的,溶解曲線是在SYBR Green法中利用染料在DNA解鏈時(shí)釋放不發(fā)射熒光,而在DNA雙鏈時(shí)與其結(jié)合發(fā)射熒光的原理制作溶解曲線的,而Taqman探針在PCR反應(yīng)時(shí)其寡核苷酸鏈由于被DNA聚合酶的外切酶活性給切斷,所以不能重新再結(jié)合故不能形成探針,所以不需要做溶解曲線.再一個(gè),溶解曲線只是為反應(yīng)體系中判斷是否有非特異性擴(kuò)增提供一個(gè)側(cè)面的依據(jù),適用于染料法.而探針?lè)ǖ奶禺愋院芨?從這方面來(lái)看也是不需要的.
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