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  • 欲以野生型大腸桿菌為出發(fā)菌株通過誘變篩選一株氨基酸營養(yǎng)缺陷型突變株,請設(shè)計實驗方案并簡要陳述理由.

    欲以野生型大腸桿菌為出發(fā)菌株通過誘變篩選一株氨基酸營養(yǎng)缺陷型突變株,請設(shè)計實驗方案并簡要陳述理由.
    啥也不說了.
    生物人氣:961 ℃時間:2020-04-05 19:54:40
    優(yōu)質(zhì)解答
    我的見解如下:
    1.先要獲得野生型大腸桿菌的純培養(yǎng)物
    2.誘變:可以選擇各種誘變法,如紫外線誘變法,將一定濃度的菌液(可分成好幾等分分別做實驗)放在一定強度的紫外燈下照射,那分成的幾等分可以分別照射10S,20S,30S,40S,50S,60S,注意,菌液不可太稀太濃,這個操作應該在黑暗的條件下進行,只允許有紫外光,以免光修復造成突變失敗.
    3.培養(yǎng):將上述菌種分別涂抹在配好的完全培養(yǎng)基上(牛肉膏-蛋白胨培養(yǎng)基),倒置培養(yǎng)過夜
    4,篩選:配置好基本培養(yǎng)基,再往上面添加一定濃度的氨基酸營養(yǎng)液,除了不要添加你說要得到的營養(yǎng)缺陷的那種氨基酸,必需氨基酸都要添加,再用影印法將3中的菌落印到這些培養(yǎng)基上,倒置培養(yǎng)過夜.
    5.挑取:直接挑取4中培養(yǎng)基上的菌落,就是你要找的氨基酸營養(yǎng)缺陷突變菌株
    在2中,之所以要分成好幾份做,再以不同時間長短去照射,是為了加大篩選的效率時間過短,可能得不到想要的突變菌種,而時間過長,菌株全死,也得不到想要的菌株,所以這樣做也可以算是一個試驗性的步驟!
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