我研究生做過低溫蛋白酶產(chǎn)生菌的篩選,很像么.
首先,請去篩選高溫菌,可以選擇附近環(huán)境長期處于高溫狀態(tài)的鍋爐、暖房等地方的土壤,有腐殖質(zhì)的地方最好,取一點土回來.
將土樣泡熱水,攪勻,輕微沉淀后取上清
將上清3000g離心5分鐘,菌就沉底了,倒掉上清,加入少量無菌水,打勻,你就獲得了濃縮的菌液
配置培養(yǎng)基,可以選擇EMB等高營養(yǎng)全培養(yǎng)基,將獲得的菌液梯度劃線于平板上
至于高溫下培養(yǎng)48小時,長出的菌落為高溫菌,盡量多的挑取單菌落,標(biāo)記代號,搖瓶培養(yǎng),獲得的菌液進(jìn)行破胞,8000g離心10分鐘,細(xì)胞殘渣沉底,上清中含有淀粉酶（如果這種菌能產(chǎn)生淀粉酶的話）
瓊脂、淀粉、水高溫滅菌,倒平板,用牛頓杯立于上面,滴入上一步離心獲得的上清,高溫處理數(shù)小時連續(xù)觀察,淀粉被分解,凝膠變清澈的就是能產(chǎn)生淀粉酶的菌液.