引物3 端前幾個堿基不配對還能擴出產(chǎn)物嗎?
引物3 端前幾個堿基不配對還能擴出產(chǎn)物嗎?
我是說在PCR時,引物出現(xiàn)錯配到300bp,但它的3端前3個堿基沒和300bp處配上.引物也可以在300bp處擴吧?只是擴時是從引物的第4個也就是和模板開始配對的堿基處開始的吧?那前幾個堿基就那么懸掛耷拉著嗎?
并希望給出易懂的解釋.
我是說在PCR時,引物出現(xiàn)錯配到300bp,但它的3端前3個堿基沒和300bp處配上.引物也可以在300bp處擴吧?只是擴時是從引物的第4個也就是和模板開始配對的堿基處開始的吧?那前幾個堿基就那么懸掛耷拉著嗎?
并希望給出易懂的解釋.
生物人氣：349 ℃時間：2020-02-06 10:20:34
優(yōu)質(zhì)解答
在高嚴(yán)謹(jǐn)?shù)臈l件下,3端不匹配很難擴出來的,5端稍微好一點,所以可以在5端加一些酶切位點什么的；但是在低嚴(yán)謹(jǐn)條件下,引物在模版多個地方可以退火.擴增的話肯定還是從延著3端第一個堿基開始,因為引物不能完全匹配模版,...
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