引物加了保護(hù)堿基和酶切位點(diǎn)（共14個(gè)堿基）后退火溫度需要調(diào)整嗎?
引物加了保護(hù)堿基和酶切位點(diǎn)（共14個(gè)堿基）后退火溫度需要調(diào)整嗎?
生物人氣：247 ℃時(shí)間：2020-02-05 07:47:33
優(yōu)質(zhì)解答
引物的3’端要與模板嚴(yán)格配對(duì),而5’端堿基沒(méi)有嚴(yán)格的限制,只要與模板DNA 結(jié)合的部分足夠長(zhǎng),其5’端堿基可不與模板DNA配對(duì)而呈游離狀態(tài),這樣,我們可以在引物的 5 末端加上酶切位點(diǎn),因此退火溫度依然取決于之前引物的退火溫度.
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