斐林試劑它是由氫氧化鈉的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1 g/mL的溶液和硫酸銅的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.05 g/mL的溶液,還有酒石酸鉀鈉配制而成的.其本質(zhì)是新配制的氫氧化銅.要求現(xiàn)配現(xiàn)用,因?yàn)闅溲趸~性質(zhì)不穩(wěn)定,而且微溶于水,放置一段時(shí)間就不能使用.我們?cè)?jīng)做過(guò)試驗(yàn),上午配置的菲林試劑4度冰箱保存,下午使用的時(shí)候測(cè)定的結(jié)果就更上午的不一樣了.它與可溶性的還原性糖(葡萄糖、果糖和麥芽糖)在加熱的條件下,能夠生成磚紅色的氧化亞銅沉淀,所以必須一直保持沸水浴的狀態(tài),以便于反應(yīng)充分進(jìn)行.
實(shí)驗(yàn)試劑
①堿性酒石酸銅甲液：稱取15g硫酸銅(CuS04.5H20)及0.05g次甲基藍(lán),溶于水中并稀釋到1000ml.
②堿性酒石酸銅乙液：稱取50g酒石酸鉀鈉及75g氫氧化鈉,溶于水中,再加入4g亞鐵氰化鉀,完全溶解后,用水稀釋至1000ml,貯存于橡皮塞玻璃瓶中.
③乙酸鋅溶液：稱取21.9g乙酸鋅,加3ml冰醋酸,加水溶解并稀釋到100ml.
④10.6％亞鐵氰化鉀溶液：稱取10.6g亞鐵氰化鉀溶于水中,稀釋至100ml
⑤0.1葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液：準(zhǔn)確稱取1.0000g經(jīng)過(guò)98—100℃干燥至恒重的無(wú)水葡萄糖,加水溶解后移入1000ml容量瓶中,加入5ml鹽酸(防止微生物生長(zhǎng)）,用水稀釋到l000ml.
3.測(cè)定方法
（1）樣品處理
取適量樣品,按一定的提取液制備原則對(duì)樣品進(jìn)行提取,提取液移入250ml容量瓶中,慢慢加入5m1乙酸鋅溶液和5ml亞鐵氰化鉀溶液,加水至刻度,搖勻后靜置30分鐘.用干燥濾紙過(guò)濾,棄初濾液,收集濾液備用.
（2）堿性酒石酸銅溶液的標(biāo)定
準(zhǔn)確吸取堿性酒石酸銅甲液和乙液各5m1,置于250ml錐形瓶中,加水10ml,加玻璃珠3粒.從滴定管滴加約9ml葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液,加熱使其在2分鐘內(nèi)沸騰,準(zhǔn)確沸騰30秒鐘,趁熱以每2秒1滴的速度繼續(xù)滴加葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液,直至溶液藍(lán)色剛好褪去為終點(diǎn)．記錄消耗葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的總體積.平行操作3次,取其平均值,按下式計(jì)算.
F=cV
式中：F一一10ml堿性酒石酸銅溶液相當(dāng)于葡萄糖的質(zhì)量,mg
c——葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度,mg/ml；
V——標(biāo)定時(shí)消耗葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的總體積,m1
（3）樣品溶液預(yù)測(cè)
吸取堿性酒石酸銅甲液及乙液各5.00ml,置于250ml錐形瓶中,加水10ml,加玻璃珠3粒,加熱使其在2分鐘內(nèi)至沸,準(zhǔn)確沸騰30s,趁熱以先快后慢的速度從滴定管中滴加樣品溶液,滴定時(shí)要始終保持溶液呈沸騰狀態(tài).待溶液藍(lán)色變淺時(shí),以每2秒1滴的速度滴定,直至溶液藍(lán)色剛好褪去為終點(diǎn).記錄樣品溶液消耗的體積.
（4）樣品溶液測(cè)定
吸取堿性酒石酸銅甲液及乙液各5.00ml,置于250ml錐形瓶中,加玻璃珠3粒,從滴定管中加入比預(yù)測(cè)時(shí)樣品溶液消耗總體積少1m1的樣品溶液,加熱使其在2分鐘內(nèi)沸騰,準(zhǔn)確沸騰30s,趁熱以每2秒1滴的速度繼續(xù)滴加樣液,直至藍(lán)色剛好褪去為終點(diǎn).記錄消耗樣品溶液的總體積.同法平行操作3份,取平均值.謝謝你的回答，但是我們所用的測(cè)葡萄糖的方法是用硫代硫酸鈉滴定的。好像在菲林試劑中有碘的存在。