條帶短,能結(jié)合的EB（或其他染料）就少,所以相對(duì)長(zhǎng)片段亮度就很弱,一般小于500就很難看清.
解決方案,基本上樓上的都提到了：
1.提高瓊脂糖凝膠濃度到2%-3%
2.跑個(gè)單酶切對(duì)照,有差異就表示有連接進(jìn)去.不過如果是要回收目的片段,建議還是用載體上的序列PCR擴(kuò)增,而且回收小于400bp的DNA不太容易呵
1%瓊脂糖電泳后,為什么看不到我的目的條帶?
1%瓊脂糖電泳后,為什么看不到我的目的條帶?
我的目的條帶是177bp,從質(zhì)粒中雙酶切后跑電泳,幾乎看不到我的目的條帶,是不是因?yàn)槟康臈l帶比較小,跑的比較前面,本身就容易變得模糊,亮度減弱的?雙酶切是20ul體系,點(diǎn)樣時(shí)用了8ul.酶切后電泳,大的條帶比較清晰,我的目的條帶177bp的幾乎看不見,不知是什么原因,
當(dāng)然加了MARKER了。還沒跑出去呢~不過謝謝回答
我的目的條帶是177bp,從質(zhì)粒中雙酶切后跑電泳,幾乎看不到我的目的條帶,是不是因?yàn)槟康臈l帶比較小,跑的比較前面,本身就容易變得模糊,亮度減弱的?雙酶切是20ul體系,點(diǎn)樣時(shí)用了8ul.酶切后電泳,大的條帶比較清晰,我的目的條帶177bp的幾乎看不見,不知是什么原因,
當(dāng)然加了MARKER了。還沒跑出去呢~不過謝謝回答
生物人氣：304 ℃時(shí)間：2020-05-27 07:16:26
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