MS培養(yǎng)基的配制包括以下步驟.培養(yǎng)基母液的配制和保存 MS培養(yǎng)基含有近30種營養(yǎng)成分,為了避免每次配制培養(yǎng)基都要對這幾十種成分進行稱量,可將培養(yǎng)基中的各種成分,按原量的20倍或200倍分別稱量,配成濃縮液,這種濃縮液叫做培養(yǎng)基母液.
MS培養(yǎng)基的配制步驟
　　植物組織培養(yǎng)中常用的一種培養(yǎng)基是MS培養(yǎng)基.
編輯本段MS培養(yǎng)基的配制步驟
　　這樣每次使用時,取其總量的1/20(50 mL)或1/200(5 mL),加水稀釋,制成培養(yǎng)液.現(xiàn)將制備培養(yǎng)基母液所需的各類物質(zhì)的量列出,供配制時使用. 　　
大量元素(母液Ⅰ) mg/L 　　NH4NO3 33 000 　　KNO3 38 000 　　CaCl2·2H2O 8 800 　　MgSO4·7H2O 7 400 　　KH2PO4 3 400 　　
微量元素(母液Ⅱ) 　　KI 166 　　H3BO3 1 240 　　MnSO4·4H2O 4 460 　　ZnSO4·7H2O 1 720 　　Na2MoO4·2H2O 50 　　CuSO4·5H2O 5 　　CoCl2·6H2O 5 　　
鐵鹽(母液Ⅲ) 　　FeSO4·7H2O 5 560 　　Na2-EDTA·2H2O 7 460 　　
有機成分(母液Ⅳ)ⅣA 　　肌醇 20 000 　?、鬊煙酸 100 　　鹽酸吡哆醇(維生素B6) 100 　　鹽酸硫胺素(維生素B1) 100 　　甘氨酸 400 　　
以上各種營養(yǎng)成分的用量,除了母液Ⅰ為20倍濃縮液外,其余的均為200倍濃縮液. 　　
上述幾種母液都要單獨配成1 L的貯備液.
其中,母液Ⅰ、母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是：每種母液中的幾種成分稱量完畢后,分別用少量的蒸餾水徹底溶解,然后再將它們混溶,最后定容到1 L. 　　
母液Ⅲ的配制方法是：將稱好的FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O分別放到450 mL蒸餾水中,邊加熱邊不斷攪拌使它們?nèi)芙?然后將兩種溶液混合,并將pH調(diào)至5?5,最后定容到1 L,保存在棕色玻璃瓶中.各種母液配完后,分別用玻璃瓶貯存,并且貼上標簽,注明母液號、配制倍數(shù)、日期等,保存在冰箱的冷藏室中. 　　
MS培養(yǎng)基中還需要加入：2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、萘乙酸(NAA)、6-芐基嘌呤(6-BA)等植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì),并且分別配成母液(0?1 mg/mL).其配制方法是：分別稱取這3種物質(zhì)各10 mg,將2,4-D和NAA用少量(1 mL)無水乙醇預(yù)溶,將6-BA用少量(1 mL)的物質(zhì)的量濃度為0.1 mol/L的NaOH溶液溶解,溶解過程需要水浴加熱,最后分別定容至100 mL,即得質(zhì)量濃度為0?1 mg/mL的母液. 　　
配制培養(yǎng)液 用量筒或移液管從各種母液中分別取出所需的用量：母液Ⅰ為50 mL,母液Ⅱ、Ⅲ、ⅣA和ⅣB各5 mL.再取2,4?D 5 mL、NAA 1 mL,與各種母液一起放入燒杯中.
編輯本段MS培養(yǎng)基配制培養(yǎng)液時的注意事項
　　配制培養(yǎng)液時應(yīng)注意： 　　①在使用提前配制的母液時,應(yīng)在量取各種母液之前,輕輕搖動盛放母液的瓶子,如果發(fā)現(xiàn)瓶中有沉淀、懸浮物或被微生物污染,應(yīng)立即淘汰這種母液,重新進行配制； 　?、谟昧客不蛞埔汗芰咳∨囵B(yǎng)基母液之前,必須用所量取的母液將量筒或移液管潤洗2次； 　　③量取母液時,最好將各種母液按將要量取的順序?qū)懺诩埳?量取1種,劃掉1種,以免出錯.溶化瓊脂 用粗天平分別稱取瓊脂9 g、蔗糖30 g,放入1 000 mL的搪瓷量杯中,再加入蒸餾水750 mL,用電爐加熱,邊加熱邊用玻璃棒攪拌,直到液體呈半透明狀.然后再將配好的混合培養(yǎng)液加入到煮沸的瓊脂中,最后加蒸餾水定容至1 000 mL,攪拌均勻. 　　需要注意的是,在加熱瓊脂、制備培養(yǎng)基的過程中,操作者千萬不能離開,否則沸騰的瓊脂外溢,就需要重新稱量、制備.此外,如果沒有搪瓷量杯,可用大燒杯代替.但要注意大燒杯底的外表面不能沾水,否則加熱時燒杯容易炸裂,使溶液外溢,造成燙傷.調(diào)pH 用滴管吸取物質(zhì)的量濃度為1 mol/L的NaOH溶液,逐滴滴入溶化的培養(yǎng)基中,邊滴邊攪拌,并隨時用精密的pH試紙(5.4～7.0)測培養(yǎng)基的pH,一直到培養(yǎng)基的pH為5.8為止(培養(yǎng)基的pH必須嚴格控制在5.8).培養(yǎng)基的分裝 溶化的培養(yǎng)基應(yīng)該趁熱分裝.分裝時,先將培養(yǎng)基倒入燒杯中,然后將燒杯中的培養(yǎng)基倒入錐形瓶(50 mL或100 mL)中.注意不要讓培養(yǎng)基沾到瓶口和瓶壁上.錐形瓶中培養(yǎng)基的量約為錐形瓶容量的1/5～1/4.每1 000 mL培養(yǎng)基,可分裝25～30瓶.培養(yǎng)基分裝完畢后,應(yīng)及時封蓋瓶口.用2塊硫酸紙(每塊大小約為9 cm×9 cm)中間夾1層薄牛皮紙封蓋瓶口,并用線繩捆扎.最后在錐形瓶外壁貼上標簽.MRS培養(yǎng)基與MS培養(yǎng)基是一樣的嗎？不是，看錯了。蛋白胨10 g，牛肉膏10 g，酵母浸膏5 g，K2HPO42 g，檸檬酸二銨2 g，乙酸鈉5 g，葡萄糖20 g，吐溫-80 1ml，MgSO4•7H2O 0.58g，MnSO4•4H2O 0.15 g，瓊脂12 g，蒸餾水1000ml，調(diào)PH值6.2-6.4，121。C高壓滅菌15-20min