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  • MRS培養(yǎng)基按配方配制好后,經(jīng)過高溫高壓滅菌后,為什么出現(xiàn)不完全凝固現(xiàn)象?

    MRS培養(yǎng)基按配方配制好后,經(jīng)過高溫高壓滅菌后,為什么出現(xiàn)不完全凝固現(xiàn)象?
    配方:蛋白胨10g,牛肉浸膏10g,酵母提取物5g,葡萄糖20g,吐溫80 1ml,檸檬酸氫二銨2g,MnSO4·H2O 0.25g,MgSO4·7H2O,K2HPO4 2g,瓊脂20g,蒸餾水1000ml.瓊脂是后面才加的,1000ml里倒出200ml不加瓊脂,另外的800ml按比例加16g的瓊脂,再分成兩份,兩份調(diào)pH為6.2,不加瓊脂那一份調(diào)pH為5.0.經(jīng)過高溫高壓滅菌后,加瓊脂的那兩份出現(xiàn)了不完全凝固,不加瓊脂的那份還出現(xiàn)了白色沉淀.請問各位大哥大姐,這究竟是什么原因呢?
    滅菌是在121℃高溫高壓下經(jīng)過20min處理的。出現(xiàn)這樣的問題,會(huì)不會(huì)是因?yàn)闇缇h(huán)境呢?培養(yǎng)基是前一天配制的,第二天才調(diào)的pH,然后再進(jìn)行滅菌。
    其他人氣:106 ℃時(shí)間:2020-01-25 19:49:57
    優(yōu)質(zhì)解答
    一樓說的問題樓主可以考慮一下.
    另外,樓主添加瓊脂后是否先將培養(yǎng)基煮沸,是瓊脂充分溶解后再進(jìn)行高溫滅菌,如果是把瓊脂分加入培養(yǎng)基后,直接放入滅菌鍋滅菌,理論上滅菌溫度足以讓瓊脂溶化,但是在實(shí)際操作過程中,也出現(xiàn)因?yàn)榄傊槿?或者分散不好使得培養(yǎng)基不能完全凝固的情況,所以建議下次配制的時(shí)候,先將瓊脂溶化并用玻璃棒充粉攪拌分散入培養(yǎng)基后,再進(jìn)行滅菌.
    至于白色沉淀的出現(xiàn)是正常的,原因可能有兩種,其一就是高溫析出,就是MRS培養(yǎng)基物質(zhì)高溫發(fā)生變化產(chǎn)生沉淀;另一可能就是如上所說,除瓊脂外,其他物質(zhì)在沒有充分?jǐn)嚢杈鶆虻那闆r下,不會(huì)自動(dòng)溶解到水中,而一直以沉淀的形式出現(xiàn).
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