還原性糖
還原性糖種類(lèi):還原性糖包括葡萄糖、果糖、半乳糖、乳糖、麥芽糖等.
非還原性糖有蔗糖、淀粉、纖維素等,但它們都可以通過(guò)水解生成相應(yīng)的還原性單糖.
還原性糖概念:還原糖是指具有還原性的糖類(lèi).在糖類(lèi)中,分子中含有游離醛基或酮基的單糖和含有游離醛基的二糖都具有還原性.
葡萄糖分子中含有游離醛基,果糖分子中含有游離酮基,乳糖和麥芽糖分子中含有游離的醛基,故它們都是還原糖.
還原性糖的鑒定
斐林試劑和雙縮脲試劑的成分相同,但二者的使用方法及原理不盡相同.斐林試劑和班氏試劑都是檢驗(yàn)還原性糖的試劑,二者的使用方法及原理、成分也有區(qū)別,下面就從這幾種試劑的使用原理、成分及使用方法等方面做一簡(jiǎn)單總結(jié).
1. 斐林試劑和雙縮脲試劑
斐林試劑和雙縮脲試劑都由溶液和溶液組成,但二者有如下三點(diǎn)不同:
(1)溶液濃度不同
斐林試劑中溶液稱(chēng)為斐林試劑甲,其濃度為溶液稱(chēng)為斐林試劑乙,其濃度為;雙縮脲試劑中溶液(雙縮脲試劑A)的濃度為,溶液(雙縮脲試劑B)的濃度為.
(2)使用原理不同
斐林試劑是新配制的溶液,它在加熱條件下與醛基反應(yīng),被還原成磚紅色的沉淀,可用于鑒定可溶性還原糖的存在.用斐林試劑鑒定可溶性還原糖時(shí),溶液的顏色變化過(guò)程為:淺藍(lán)色→棕色→磚紅色(沉淀).
鑒定生物組織中是否含有蛋白質(zhì)時(shí),常用雙縮脲法,使用的是雙縮脲試劑,發(fā)生的是雙縮脲反應(yīng).雙縮脲反應(yīng)實(shí)質(zhì)是在堿性環(huán)境下的與雙縮脲試劑發(fā)生的紫色反應(yīng).而蛋白質(zhì)分子中含有很多與雙縮脲()結(jié)構(gòu)相似的肽鍵,所以蛋白質(zhì)都能與雙縮脲試劑發(fā)生顏色反應(yīng),可以用雙縮脲試劑鑒定蛋白質(zhì)的存在.
(3)使用方法不同
斐林試劑使用時(shí),先反溶液和溶液混合(將滴溶液滴入溶液中),而后立即使用:雙縮脲試劑使用時(shí),先加入溶液(2mL),振蕩搖勻,造成堿性的反應(yīng)環(huán)境,然后再加入3~4滴溶液,振蕩搖勻后觀察現(xiàn)象.
2. 斐林試劑和班氏試劑
關(guān)于斐林試劑和班氏試劑,可用下面的例題引出其異同點(diǎn):例:你可用什么方法,檢驗(yàn)人的尿液中是否含有糖?
答案:
方法一:在試管中加入人的尿液0.1mL,加入班氏糖定性試劑1mL,混合均勻后,將試管放入盛有開(kāi)水的燒杯中,加熱煮沸1min~2min,若試管中溶液在加熱后產(chǎn)生了磚紅色沉淀,說(shuō)明尿液中含有糖.
方法二:取少許尿液加水稀釋后,加入剛配制好的斐林試劑,沸水浴加熱后,若出現(xiàn)磚紅色沉淀,則說(shuō)明尿液中含有糖.
方法三:取少許尿液加水稀釋后,加入少許懸濁液(新制)加熱,若出現(xiàn)磚紅色沉淀,則說(shuō)明尿液中含有糖.
因斐林試劑實(shí)質(zhì)上是新配制的溶液,所以方法二與方法三的實(shí)質(zhì)是相同的,只是說(shuō)法不同而已.
由以上例題可以看出,斐林試劑和班氏試劑都能用于鑒定可溶性還原糖(上題中檢驗(yàn)的是葡萄糖)的存在,二者有相同點(diǎn),也有不同點(diǎn).
二者的不同點(diǎn),可以歸納為以下幾點(diǎn):
(1)班氏試劑常用于尿糖的鑒定,其配方與斐林試劑不一樣,其配方為:
①400mL水中加85g檸檬鈉和50g無(wú)水碳酸鈉;
②50mL加熱的水中加入8.5g無(wú)水硫酸銅.制成溶液;
③把溶液倒入檸檬酸鈉溶液中,邊加邊攪,如產(chǎn)生沉淀可濾去.
(2)其反應(yīng)原理與斐林試劑略有差別.利用斐林試劑鑒定時(shí),斐林試劑甲和斐林試劑乙直接反應(yīng)生成和可溶性還原糖反應(yīng)產(chǎn)生磚紅色沉淀.而班氏試劑中的產(chǎn)生卻是這樣的:檸檬酸鈉和碳酸鈉均為強(qiáng)堿弱酸鹽,在水中它們均可水解產(chǎn)生,與檸檬酸鈉溶液和溶液混合時(shí),結(jié)合,生成與葡萄糖中的醛基反應(yīng)生成磚紅色沉淀.
(3)兩種試劑的保存方式不同.斐林試劑甲和斐林試劑乙可強(qiáng)烈產(chǎn)生,很容易沉淀析出,因此斐林試劑一般為現(xiàn)用現(xiàn)配;而班氏試劑的配方中,檸檬酸鈉為一對(duì)緩沖物質(zhì),產(chǎn)生的數(shù)量有限,與溶液混合后產(chǎn)生的濃度相對(duì)較低,不易析出,因此該試劑可長(zhǎng)期保存.
當(dāng)然,無(wú)論用班氏試劑還是斐林試劑,歸根結(jié)底都是與醛基在沸水浴加熱條件下反應(yīng)而生成磚紅色的沉淀,兩者反應(yīng)現(xiàn)象一樣,這就是二者的相同之處.
用于鑒定可溶性還原糖的實(shí)驗(yàn)材料準(zhǔn)備
植物組織是常用的實(shí)驗(yàn)材料,但必須加以選擇.在雙子葉植物中,光合作用的主要產(chǎn)物葡萄糖形成后合成為淀粉,暫時(shí)儲(chǔ)藏在葉子內(nèi),因此最好不用雙子葉植物的葉子作實(shí)驗(yàn)材料.有些單子葉植物,如韭菜、鳶尾,并不將光合作用的初始產(chǎn)物轉(zhuǎn)變?yōu)榈矸?因此葉內(nèi)含有大量的可溶性單糖,但是,由于葉片中葉綠素的顏色較深,對(duì)于鑒定時(shí)的顏色反應(yīng)起著掩蓋作用,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象不明顯,因此,也不宜用單子葉植物的葉子作實(shí)驗(yàn)材料.
本實(shí)驗(yàn)最理想的實(shí)驗(yàn)材料是含糖量較高的生物組織(或器官),而且組織的顏色較淺,或近于白色的,如蘋(píng)果和梨的果實(shí).經(jīng)試驗(yàn)比較,顏色反應(yīng)的明顯程度依次為蘋(píng)果、梨、白色甘藍(lán)葉、白蘿卜.
什么是還原性糖?
什么是還原性糖?
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