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  • 博凌科為TRIpure LS Reagent 血液(血液樣本)RNA抽提試劑提取DNA時(shí),血液樣品如何保存?提取步驟是怎樣的

    博凌科為TRIpure LS Reagent 血液(血液樣本)RNA抽提試劑提取DNA時(shí),血液樣品如何保存?提取步驟是怎樣的
    生物人氣:746 ℃時(shí)間:2020-06-21 12:18:04
    優(yōu)質(zhì)解答
    博凌科為TRIpure LS Reagent 血液(血液樣本)RNA抽提試劑
    TRIpure LS Reagent試劑是直接從來源于人,動(dòng)物、植物,酵母,細(xì)菌和病毒的液體樣品中提取總RNA的試劑.在提取血液等液體樣品的RNA時(shí)按一定體積比加入該試劑即可.省去了在處理樣品前離心去除液體的步驟.
    使用該試劑可以同時(shí)提取DNA及蛋白質(zhì).提取的RNA樣品可以用于后繼的RT-PCR、Northern blot、dot雜交及體外轉(zhuǎn)錄等實(shí)驗(yàn).回收的DNA片段可以用于PCR反應(yīng).

    血液樣品的保存:
    為了保證提取效果,請(qǐng)選擇新鮮的血液進(jìn)行RNA的提取.在收集到血液樣品后,需要加入抗凝劑.抗凝劑的選擇首選EDTA,其他抗凝劑如:檸檬酸鹽、肝素或者ACD也可以使用.加入抗凝劑的血液樣品最好在幾個(gè)小時(shí)內(nèi)進(jìn)行RNA提取實(shí)驗(yàn).不同種類的mRNA,其半衰期也不盡相同.調(diào)控基因的mRNA的半衰期比看家基因mRNA的半衰期要短.因此,為了保證所提取的RNA能夠包含更全面的信息,請(qǐng)盡量避免使用保存時(shí)間過長的血液進(jìn)行RNA的提取.

    基本步驟:
    ◆按照3:1的體積比例加入TRIpure LS reagent和待提取的液體樣品(固體樣品用水調(diào)整體積比至3:1)振蕩混勻.
    ◆加入氯仿幫助有機(jī)相和水相分層.
    ◆異丙醇沉淀RNA.
    ◆漂洗RNA沉淀.
    ◆RNase-free H2O重新溶解RNA沉淀.

    注:本產(chǎn)品不需要進(jìn)行紅細(xì)胞裂解的步驟,更快,純度高.
    產(chǎn)品特點(diǎn):
    ◆方便--- 不需要分離紅細(xì)胞和白細(xì)胞
    不需要進(jìn)行另外的紅細(xì)胞裂解步驟.

    保存條件:
    2-8℃ 避光保存一年.

    提取范圍:
    血液、血清、血漿、病毒培養(yǎng)液以及任何液體形式的樣品中提取RNA.

    產(chǎn)量:
    每1ml液體樣品或1mg組織或1×106培養(yǎng)細(xì)胞預(yù)期的RNA產(chǎn)量
    1.人和動(dòng)物全血,15~20μg
    2.人淋巴細(xì)胞(約7×107白細(xì)胞),60~70μg
    3.肝和脾,6~10μg
    4.腎,3~4μg
    5.骨骼肌和腦組織,1~1.5μg
    6.胎盤,1~4μg
    7.上皮細(xì)胞(1×106 cultured cells),8~15μg
    8.纖維母細(xì)胞(1×106 cultured cells),5~7μg
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