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  • 請教如何計(jì)算出兼并引物的退火溫度

    請教如何計(jì)算出兼并引物的退火溫度
    我是一個(gè)新手,如何根據(jù)公司送來的兼并引物的單子上的Tm值推出實(shí)際PCR時(shí)的退火溫度呢?引物單子上有兩個(gè)Tm值,分別是1M 鈉離子,50mM鈉離子條件下的Tm值.實(shí)際PCR時(shí)的退火溫度怎么算呢?
    化學(xué)人氣:538 ℃時(shí)間:2020-02-04 03:25:29
    優(yōu)質(zhì)解答
    實(shí)際pcr的退火溫度一般都是從55℃開始的,有雜帶退火溫度就提高一點(diǎn),目的帶比較微弱退火溫度就降低一點(diǎn),不用管那個(gè)引物單子上的溫度,那樣太麻煩,有的實(shí)驗(yàn)室一天做幾百個(gè)樣品的pcr,如果個(gè)個(gè)要看引物單子上的溫度然后在設(shè)計(jì)條件,你想想看,那得用多少臺(tái)pcr儀器啊,所以一般都取默認(rèn)條件,55℃30s
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