為什么做PCR設(shè)定引物退火溫度時設(shè)定的退火溫度要比合成引物得到的引物Tm值低幾度?
為什么做PCR設(shè)定引物退火溫度時設(shè)定的退火溫度要比合成引物得到的引物Tm值低幾度?
生物人氣:576 ℃時間:2020-04-12 03:51:48
優(yōu)質(zhì)解答
Tm指的是把DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)降解一半時的溫度.我們PCR時候,當(dāng)然不能用Tm值來作為退火的溫度.一般來說,退火溫度比Tm值要低上5度左右.但是這個也不是絕對的.建議你如果說模板比較充足的話,做一個梯度試驗.范圍在Tm值周...
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