接種
將微生物接到適于它生長(zhǎng)繁殖的人工培養(yǎng)基上或活的生物體內(nèi)的過程叫做接種.
1、接種工具和方法
在實(shí)驗(yàn)室或工廠實(shí)踐中,用得最多的接種工具是接種環(huán)、接種針.由于接種要求或方法的不同,接種針的針尖部常做成不同的形狀,有刀形、耙形等之分.有時(shí)滴管、吸管也可作為接種工具進(jìn)行液體接種.在固體培養(yǎng)基表面要將菌液均勻涂布時(shí),需要用到涂布棒.
常用的接種方法有以下幾種:
1)劃線接種 這是最常用的接種方法.即在固體培養(yǎng)基表面作來回直線形的移動(dòng),就可達(dá)到接種的作用.常用的接種工具有接種環(huán),接種針等.在斜面接種和平板劃線中就常用此法.
2)三點(diǎn)接種 在研究霉菌形態(tài)時(shí)常用此法.此法即把少量的微生物接種在平板表面上,成等邊三角形的三點(diǎn),讓它各自獨(dú)立形成菌落后,來觀察、研究它們的形態(tài).除三點(diǎn)外,也有一點(diǎn)或多點(diǎn)進(jìn)行接種的.
3)穿刺接種 在保藏厭氧菌種或研究微生物的動(dòng)力時(shí)常采用此法.做穿刺接種時(shí),用的接種工具是接種針.用的培養(yǎng)基一般是半固體培養(yǎng)基.它的做法是:用接種針蘸取少量的菌種,沿半固體培養(yǎng)基中心向管底作直線穿刺,如某細(xì)菌具有鞭毛而能運(yùn)動(dòng),則在穿刺線周圍能夠生長(zhǎng).
4)澆混接種 該法是將待接的微生物先放入培養(yǎng)皿中,然后再倒入冷卻至45°C左右的固體培養(yǎng)基,迅速輕輕搖勻,這樣菌液就達(dá)到稀釋的目的.待平板凝固之后,置合適溫度下培養(yǎng),就可長(zhǎng)出單個(gè)的微生物菌落.
5)涂布接種 與澆混接種略有不同,就是先倒好平板,讓其凝固,然后再將菌液倒入平板上面,迅速用涂布棒在表面作來回左右的涂布,讓菌液均勻分布,就可長(zhǎng)出單個(gè)的微生物的菌落.
6)液體接種 從固體培養(yǎng)基中將菌洗下,倒入液體培養(yǎng)基中,或者從液體培養(yǎng)物中,用移液管將菌液接至液體培養(yǎng)基中,或從液體培養(yǎng)物中將菌液移至固體培養(yǎng)基中,都可稱為液體接種.
7)注射接種 該法是用注射的方法將待接的微生物轉(zhuǎn)接至活的生物體內(nèi),如人或其它動(dòng)物中,常見的疫苗預(yù)防接種,就是用注射接種,接入人體,來預(yù)防某些疾病.
8)活體接種 活體接種是專門用于培養(yǎng)病毒或其它病原微生物的一種方法,因?yàn)椴《颈仨毥臃N于活的生物體內(nèi)才能生長(zhǎng)繁殖.所用的活體可以是整個(gè)動(dòng)物;也可以是某個(gè)離體活組織,例如猴腎等;也可以是發(fā)育的雞胚.接種的方式是注射,也可以是拌料喂養(yǎng).
實(shí)驗(yàn)室常用方法
(一)斜面接種:由已長(zhǎng)好微生物的斜面中挑取少量菌種接種至另一空白斜面培養(yǎng)基上.
(1)接種前用記號(hào)筆在距試管口2~3cm位置上,注明菌名、接種日期等.
(2)將試管放于手掌中,并用手指夾住,使兩支試管呈“V”字形.
(3)用火焰將接種環(huán)燒紅,然后將接種環(huán)來回通過火焰數(shù)次.
(4)用小指、無名指和手掌拔下試管塞,并持于手中.
(5)將試管口在火焰上微燒一周.
(6)將燒過的接種環(huán)伸入菌種管內(nèi),先將環(huán)接觸一下沒有長(zhǎng)菌的培養(yǎng)基部分,使其冷卻,以免燙死菌體,然后用環(huán)在菌苔上輕輕地接觸,刮下少許培養(yǎng)物,并將接種環(huán)慢慢 的從試管中抽出,并迅速地伸入另一試管中,在斜面上劃線(波浪或直線),使菌體沾附在培養(yǎng)基上.
(7)將接種環(huán)抽出,灼燒管口.
(8)塞上棉塞.
(9)將接種環(huán)經(jīng)火焰灼燒滅菌.
(二)液體接種:由斜面菌種接種在液體培養(yǎng)基中
(1)接種前用記號(hào)筆在距試管口2~3cm位置上,注明菌名、接種日期等.
(2)將試管放于手掌中,并用手指夾住,使兩支試管呈“V”字形.
(3)用火焰將接種環(huán)燒紅,然后將接種環(huán)來回通過火焰數(shù)次.
(4)用小指、無名指和手掌拔下試管塞,并持于手中.
(5)將試管口在火焰上微燒一周.
(6)參照?qǐng)D(7-1)
(7)將接種環(huán)抽出,灼燒管口.
(8)塞上棉塞.
(9)將接種環(huán)經(jīng)火焰灼燒滅菌.
微生物接種地方法及操作要點(diǎn)
微生物接種地方法及操作要點(diǎn)
生物人氣:125 ℃時(shí)間:2020-04-05 08:15:45
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