一、實驗目的與原理
雞卵粘蛋白存在于雞蛋清中,對胰蛋白酶有強烈的抑制作用,高純度的雞卵粘蛋白抑制胰蛋白酶的分子酶的分子比為1:1.雞卵粘蛋白在中性或酸性溶液中對熱和高濃度的脲都是相當穩(wěn)定的,而在堿性溶液中較不穩(wěn)定.
由于雞卵粘蛋白對胰蛋白酶有強烈的抑制作用,因此可以用雞卵粘蛋白做親和配基配制純化胰酶的親和材料.
二、材料與試劑：
1．材料：新鮮雞蛋2只
2：儀器：抽濾瓶500－1000ml、燒結漏斗、移液器、磁力攪拌器
3：試劑：
10％TCA,用固體NaOH調調PH至1.05－1.10,需要50ml、5N HCL、5N NaOH、冷丙酮、胰蛋白酶液、BAEE-0.05M,PH8.0Tris-HCL緩沖液（每ml含0.34BAEE和2.22mgCaCL2）,50ml
pH8.0,0.1M Tris-HCL緩沖液
三、操作步驟
1,取兩只新鮮雞蛋,得蛋清50ml,置于燒杯中,外用溫水浴25℃－30℃,在不斷攪拌條件下,緩慢加入等體積得三氯乙酸－丙酮（1:2V/V）,立即出現大量白色絮狀沉淀,加完后最終PH約3.5,再繼續(xù)攪拌30min,然后在4℃冰箱中放置過夜.
2,次日用布氏漏斗抽濾,得黃綠色清液.
3,邊攪拌邊加入4℃預冷的丙酮200ml沉淀蛋白,在4℃放置2h之后將上清液小心倒入瓶中回收,下部沉淀部分于4000rpm離心5min,收集沉淀.
4,將沉淀溶于10ml無離子水中,對無離子水（50倍）透析4h,換水兩次,再對碳酸鈉緩沖液透析過夜,4000rpm離心10min ,去除不溶物.