非常重要,因為根據(jù)原理,RT-PCR是假設(shè)看家基因的表達恒定從而得出目標(biāo)基因的相對含量
所以,必須要確保看家基因本身不會受到實驗條件的影響,即看家基因在對照組與實驗組具有相同的表達量
請仔細(xì)閱讀原始文獻
Analysis of relative gene expression data using real-time quantitative PCR and the 2(-Delta Delta C(T)) Method很多實驗室都默認(rèn)使用actin或者18s ？這倆可靠嗎一個細(xì)胞骨架，一個核糖體結(jié)構(gòu)，理論上都是細(xì)胞必須且穩(wěn)定表達的，是廣泛使用的看家基因。無論用哪種，最好還是要跑一下是否不受實驗處理的影響，不要直接使用