SDS-PAGE的分離膠和濃縮膠中tris-Hcl的PH不同,為什么?什么作用?
SDS-PAGE的分離膠和濃縮膠中tris-Hcl的PH不同,為什么?什么作用?
分離膠中的緩沖液PH為8.8,濃縮膠中的為6.8
分離膠中的緩沖液PH為8.8,濃縮膠中的為6.8
其他人氣：584 ℃時間：2020-05-04 03:45:14
優(yōu)質(zhì)解答
在SDS－PAGE不連續(xù)電泳中,制膠緩沖液使用的是Tris－HCL緩沖系統(tǒng),濃縮膠是pH6.7,分離膠pH8.9；而電泳緩沖液使用的Tris－甘氨酸緩沖系統(tǒng).在濃縮膠中,其pH環(huán)境呈弱酸性,因此甘氨酸解離很少,其在電場的作用下,泳動效率低；而CL離子卻很高,兩者之間形成導電性較低的區(qū)帶,蛋白分子就介于二者之間泳動.由于導電性與電場強度成反比,這一區(qū)帶便形成了較高的電壓剃度,壓著蛋白質(zhì)分子聚集到一起,濃縮為一狹窄的區(qū)帶.當樣品進入分離膠后,由于膠中pH的增加,呈堿性,甘氨酸大量解離,泳動速率增加,直接緊隨氯離子之后,同時由于分離膠孔徑的縮小,在電場的作用下,蛋白分子根據(jù)其固有的帶電性和分子大小進行分離.
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