操作步驟是先加RNA、OligodT、隨即引物、水
65C反應(yīng)10min,冰上放置5min后：這一步是讓RNA變性,把RNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)打開(kāi)；
再加dNTP,RNaseA,BUFFER,MTV逆轉(zhuǎn)錄酶,
反應(yīng)25℃10min：這一步是讓反轉(zhuǎn)錄引物（oligodT,隨機(jī)引物）和模板RNA退火結(jié)合
37℃60min：這一步是反轉(zhuǎn)錄酶的工作溫度
70℃10min：這一步是變性,把合成的cDNA和RNA變性開(kāi),就拿到單鏈的cDNA
RNA是如何反轉(zhuǎn)錄成cDNA的?過(guò)程和原理怎樣?
RNA是如何反轉(zhuǎn)錄成cDNA的?過(guò)程和原理怎樣?
我做反轉(zhuǎn)錄的操作步驟是先加RNA、OligodT、隨即引物、水,65C反應(yīng)10min,冰上放置5min后,再加dNTP,RNaseA,BUFFER,MTV逆轉(zhuǎn)錄酶,反應(yīng)25℃10min,37℃60min,70℃10min.我想請(qǐng)教每一步的原理,為什么這么做?
我做反轉(zhuǎn)錄的操作步驟是先加RNA、OligodT、隨即引物、水,65C反應(yīng)10min,冰上放置5min后,再加dNTP,RNaseA,BUFFER,MTV逆轉(zhuǎn)錄酶,反應(yīng)25℃10min,37℃60min,70℃10min.我想請(qǐng)教每一步的原理,為什么這么做?
生物人氣：350 ℃時(shí)間：2020-04-12 02:49:04
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