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  • RNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA 原理 主要想知道各個(gè)水浴、冰浴步驟在實(shí)驗(yàn)中的作用

    RNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA 原理 主要想知道各個(gè)水浴、冰浴步驟在實(shí)驗(yàn)中的作用
    RNA反轉(zhuǎn)錄過(guò)程步驟如下:
    將提取的RNA用DEPC水吹起,加入引物1、引物2,加入dNTP,放入70度水浴5min,冰浴1min,然后加入DTT\BUFFER酶,37度水浴2h,70度水浴10min,冰浴2min.
    請(qǐng)問(wèn)70度水浴,37度水浴,冰浴在實(shí)驗(yàn)中起什么作用?
    生物人氣:519 ℃時(shí)間:2020-04-14 01:26:36
    優(yōu)質(zhì)解答
    第一次70度水浴5min為讓RNA二級(jí)結(jié)構(gòu)打開(kāi),便于引物結(jié)合.
    第一次冰浴1min為了退火,讓引物能夠結(jié)合RNA.
    37度水域是讓cDNA聚合.
    第二次70℃水浴是再變性,讓引物脫離模板RNA和cDNA第一鏈.
    第二次冰浴是為了讓cDNA-RNA復(fù)性成為cDNA-RNA雜合雙鏈.
    明白沒(méi)有?
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