首先在設(shè)計引物的時候,要注意避免產(chǎn)生引物二聚體.現(xiàn)在的引物設(shè)計軟件都會有一個dimer的選項,可以看出你設(shè)計的引物是否會發(fā)生二聚體.如果會形成二聚體,并且序列不能有大的變動,那就注意一下在3'端別發(fā)生dimer的互補.
其次,在PCR時提高退火溫度可以提高PCR的特異性,可以減少引物二聚體.
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