不排除是預(yù)染Marker質(zhì)量又問題marker沒有問題，實(shí)驗(yàn)室其他人做實(shí)驗(yàn)就沒有問題。因?yàn)槲沂仟?dú)立出來的，所以實(shí)驗(yàn)過程和儀器與他們不是很相同那建議你在適當(dāng)延長一下轉(zhuǎn)膜的時間吧，三、四個小時都可以的。用抗體檢測過之后，150kd的蛋白都轉(zhuǎn)過去了，各種大小的蛋白都有轉(zhuǎn)過去。也正常，marker應(yīng)該不會需要太長時間。我轉(zhuǎn)膜時上下的濾紙有接觸，會影響marker的轉(zhuǎn)膜嗎？濾紙接觸不會有任何影響，既然大分子蛋白轉(zhuǎn)過去了，說明一定是你的預(yù)染Marker是有問題的，一般預(yù)染Marker上樣之前也要用水煮一下的，再用就是是不是你的用量少了呢？用量不少，不過marker沒有煮過，預(yù)染的應(yīng)該不用煮吧也許這是問題所在吧嗯，多加一些，至少也得6uL，我們用的時候都煮一下的。