博凌科為1．貼壁細胞 ,讓細胞自己在蓋玻片上爬片.操作如下：A.取普通潔凈蓋玻片于70%乙醇中浸泡5分鐘或更長時間,無菌超凈臺內(nèi)吹干或用細胞培養(yǎng)PBS或0.9%NaCl等溶液洗滌三遍,再用細胞培養(yǎng)液洗滌一遍.將蓋玻片置于六孔板內(nèi),種入細胞培養(yǎng)過夜,使約為50%-80%滿.B.刺激細胞發(fā)生凋亡后,吸盡培養(yǎng)液,加入0.5ml固定液,固定10分鐘或更長時間（可4℃過夜）.C.去固定液,用PBS或0.9%NaCl洗兩遍,每次3分鐘,吸盡液體.洗滌時宜用搖床,或手動晃動數(shù)次.D.加入0.5ml Hoechst 33258染色液,染色5分鐘.也宜用搖床,或手動晃動數(shù)次.E.用PBS或0.9%NaCl洗兩遍,每次3分鐘.F.滴一滴抗熒光淬滅封片液于載玻片上,蓋上貼有細胞的蓋玻片,盡量避免氣泡.使細胞接觸封片液,切勿弄反.G.熒光顯微鏡可檢測到呈藍色的細胞核.2.懸浮細胞A.離心收集細胞樣品于1.5ml離心管內(nèi),加入0.5ml固定液,緩緩懸起細胞,固定10分鐘或更長時間（可4℃過夜）.B.離心去固定液,用PBS或0.9%NaCl洗兩遍,每次3分鐘.洗滌期間手動晃動.C.最后一次離心后吸去大部分液體保留約50ml液體,再緩緩懸起細胞,滴加至載玻片上,盡量使細胞分布均勻.D.稍晾干,使細胞貼在載玻片上不易隨液體流動.E.均勻滴上0.5ml Hoechst 33258染色液,染色5分鐘.用吸水紙從邊緣吸去液體,微晾干.F.用PBS或0.9%NaCl洗兩遍,每次3分鐘.G.滴一滴抗熒光淬滅封片液于載玻片上,蓋上一潔凈的蓋玻片,盡量避免氣泡.H.熒光顯微鏡可檢測到呈藍色的細胞核.3.組織切片A.常規(guī)包埋切片后,脫臘,透明.B.PBS或0.9%NaCl洗兩遍,每次3分鐘,吸盡液體.洗滌時宜用搖床,或手動晃動數(shù)次.可在六孔板中操作.C.加入0.5ml Hoechst 33258染色液,染色5分鐘.也宜用搖床,或手動晃動.D.用PBS或0.9%NaCl洗兩遍,每次3分鐘.E.將切片置于載玻片上,滴一滴抗淬滅封片液,蓋上一潔凈的蓋玻片,盡量避免氣泡.F.熒光顯微鏡可檢測到呈藍色的細胞核.