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  • 質(zhì)粒DNA瓊脂糖凝膠電泳中質(zhì)粒超螺旋、開環(huán)、直鏈跑膠快慢次序是什么?

    質(zhì)粒DNA瓊脂糖凝膠電泳中質(zhì)粒超螺旋、開環(huán)、直鏈跑膠快慢次序是什么?
    聽學長說其實不是線性的跑得最慢.而是開環(huán)的跑得最慢,他們自己做實驗得到的結(jié)果,我想問問各位真正(注意不要道聽途說和各種搬運工!)做過實驗的得到的結(jié)論是什么?
    生物人氣:941 ℃時間:2020-04-01 19:54:31
    優(yōu)質(zhì)解答
    我碩士專業(yè)是分子生物學這方面的,我可以很負責地告訴你,質(zhì)粒DNA分子具有三種構(gòu)型:共價閉合環(huán)開DNA(cccDNA,SC構(gòu)型)、開環(huán)DNA(OC構(gòu)型)和線性分子(L構(gòu)型).在細菌體內(nèi),質(zhì)粒DNA是以負超螺旋構(gòu)型存在的.在瓊脂糖凝膠電泳中不同構(gòu)型的的同一種質(zhì)粒DNA,盡管分子量相同,但具有不同的電泳遷移率.其中跑在最前沿的是共價閉合DNA,其后依次是線性DNA和開環(huán)DNA,其原因是共價閉合的DNA其空間位阻最小,所以跑得最快.而開環(huán)DNA空間位阻最大,所以跑得最慢.
    這些結(jié)論都是經(jīng)得起實驗考驗的,我在做質(zhì)粒的上有沒有這個酶切位點鑒定的時候,我就會用原質(zhì)粒和經(jīng)過單酶切的質(zhì)粒在同一塊膠上進行電泳,看單酶切后的質(zhì)粒是不是比原質(zhì)粒跑得快從而鑒定出質(zhì)粒有沒有被切開.這個也分子生物學領(lǐng)域應用很廣泛,PCR-RFLP方法就是基于這個原理進行限制性內(nèi)切酶圖譜方面的鑒定的.
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