質(zhì)粒作為基因工程載體的優(yōu)點(diǎn)
質(zhì)粒作為基因工程載體的優(yōu)點(diǎn)
生物人氣:571 ℃時(shí)間:2020-04-05 17:29:31
優(yōu)質(zhì)解答
:(1)具有較小的分子量.經(jīng)驗(yàn)表明,為了避免在DNA的純化過程中發(fā)生鏈的斷裂,克隆載體的分子大小最好不要超過10Kb.pBR322質(zhì)粒這種小分子量的特點(diǎn),不僅易于自身DNA的純化,而且可容納較大的外源DNA片段;(2)具有兩種抗菌素抗性基因可供作轉(zhuǎn)化子的選擇記號,能指示載體或重組DNA分子是否進(jìn)入宿主細(xì)胞以及外源DNA分子是否插入載體分子形成了重組子.標(biāo)記基因往往可以賦予宿主細(xì)胞一種新的表型,這種轉(zhuǎn)化細(xì)胞可明顯地區(qū)別于非轉(zhuǎn)化細(xì)胞.當(dāng)我們把一個(gè)DNA片段插入到某一個(gè)標(biāo)記基因內(nèi)時(shí),該基因就失去了相應(yīng)的功能.當(dāng)把這種重組DNA分子轉(zhuǎn)到宿主細(xì)胞后,該基因原來賦予的表型也就消失了.要是仍保留了原來表型的轉(zhuǎn)化細(xì)胞,細(xì)胞內(nèi)含有的DNA分子一定不是重組子.很顯然,既要指示外源DNA是否進(jìn)入了宿主細(xì)胞,又要指示載體DNA分子中是否插入了外源DNA片段,那么這種載體必須至少具有兩個(gè)標(biāo)記基因.另外,pBR322質(zhì)粒載體還具較高的拷貝數(shù),而且經(jīng)過氯霉素?cái)U(kuò)增之后,每個(gè)細(xì)胞中可積累1000~3000個(gè)拷貝,這就為重組體DNA的制備提供了極大的方便.
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